如何利用人IGG elisa試劑盒檢測IGG指標，HUMAN IGG ELISA KIT

 人IGG的elisa試劑盒，是一種利用雙抗體(ti) 夾心法測定標本中IGG水平的科研試劑盒。ky体育亚洲杯專(zhuan) 業(ye) 生物試劑人的IGG elisa檢測試劑盒，質量可靠，價(jia) 格低廉。我們(men) 所生物試劑人IGG(免疫球蛋白G)elisa試劑盒，具有度高於(yu) 市場同類產(chan) 品，性價(jia) 比在市場上具有很強的優(you) 勢，如果有質量問題或者測試結果有問題，免費包退換。歡迎廣大師生朋友訂購，，號。

以下給大家介紹一下有關(guan) 於(yu) 人IGG elisa試劑盒的一些研究報道，希望對大家的研究有所幫助：

定量檢測科研血清IgG蛋白質芯片的研製及應用研究

 隨著人類基因組測序工作的完成,對基因表達產(chan) 物蛋白質的研究已成熱點。為(wei) 揭示眾(zhong) 多蛋白質的作用和相互關(guan) 係,從(cong) 而真正解釋基因功能,以蛋白質組學為(wei) 核心的後基因組研究已成為(wei) 必然趨勢。蛋白芯片(protein chip)是按預先設計的方式將抗原或抗體(ti) 固定在玻片上,形成蛋白質的微陣列,即蛋白質芯片,帶有特殊標記的蛋白質分子(抗體(ti) 或抗原)與(yu) 之特異性結合,通過對標記物的檢測來實現抗原抗體(ti) 的高通量互檢。該技術所需蛋白質的量極少,檢測反應相對較快,具有通量化,穩定性較好,靈敏度較高。

目前在國內(nei) 外這方麵的研究都才剛剛起步。蛋白質芯片以蛋白質代替DNA作為(wei) 檢測目的物,比基因芯片更接近生命活動的物質層麵,因而有著比基因芯片更加直接的應用前景。同時由於(yu) 蛋白質芯片可利用微量生理或生物采樣即可同時檢測不同的蛋白質分子和蛋白質分子之間的相互作用,獲得各種條件下蛋白質組的變化.進而得以對基因的表達情況及基因功能進行深入研究。高通量定量檢測的蛋白質芯片是研究檢測和實驗研究*工具,本研究為(wei) 研製玻片為(wei) 載體(ti) 的高通量蛋白質芯片,以科研血清IgG為(wei) 研究模型,建立定量檢測蛋白質芯片技術平台,並應用於(yu) 科研血清IgG的檢測,其檢測結果與(yu) 傳(chuan) 統的ELISA方法比較。

研究內(nei) 容分兩(liang) 個(ge) 部分,1.介質表麵修飾對蛋白質芯片固定率和反應性的影響。2.定量檢測科研血清IgG蛋白質芯片研製及應用研究。 *部分:對zui常用的三種玻璃表麵化學修飾方法對蛋白質芯片質量的影響進行評價(jia) 。為(wei) 研製評價(jia) 蛋白質固定效率的芯片,用Cy3標記的山羊抗人IgG抗體(ti) 樣品,用含40%甘油的PBS溶液稀釋成為(wei) 0.5 mg/L,0.75 mg/L,1 mgm,1.25 mg/L,1.5 mg╱L,1.75 mg╱L,2.0 mg╱L等濃度。取戊二醛、poly-L-lysine,GTPS環氧基修飾的玻片各一塊,按上述濃度點樣,每一濃度點1列3點,形成3×7的陣列,點樣過程的溫度為(wei) 室溫(25℃),濕度為(wei) 30%～40%。點樣完成後,將玻片放入濕盒中進行溫浴4h,晾幹,用Genepix4000B掃描儀(yi) 獲取熒光圖象。取出玻片,用PBST(PBS中含0.1%Tween-20)清洗3遍,每次5 min,再用PBS清洗5 min,晾幹,再用Genepix4000B掃描儀(yi) 獲取熒光圖象。 為(wei) 研製評價(jia) 蛋白質反應性的芯片,用倍比稀釋法,連續科研血清lgG樣品分別至3.125mg╱L,6.25mg/L,12.5mg/L,25mg╱L,50mg/L,100mg╱L等濃度,在戊二醛、poly-L-lysine修飾的玻片點樣,每一濃度點1列3點,形成3×7的陣列,點樣過程的溫度為(wei) 室溫(25℃),濕度為(wei) 30%～40%。點樣完成後,將玻片放入濕盒中進行:37℃溫浴4h,晾幹,用1%BSA(質量體(ti) 積比)作封閉,將玻片放入封閉液反應1h,降低非特異性吸附,用PBST(PBS中含0.1%Tween-20)清洗3遍,每次5min,再用PBS清洗5 min,將戊二醛修飾的破片用0.2%的硼化鈉還原Schiff堿形成更穩定的單鍵結構。取Cy3 goat-anti-human IgG(0.5 mg╱L)1.6μl到芯片陣列的表麵,用蓋玻片壓勻,放入濕盒中進行37℃溫浴1h,取出用PBST(PBS中含0.1%Tweon-20)清洗3遍,每次5 min,再用PBS清洗5 min,晾幹,掃描儀(yi) 獲取熒光圖象。三種修飾方法的芯片均可使蛋白質保持較好的固定效率和反應活性,由共價(jia) 鍵偶聯的戊二醛修飾玻片不僅(jin) 有更高的反應活性,而且圖象佳,但背景略高。預點樣10個(ge) 拷貝點後,各蛋白質樣品的熒光測量值趨於(yu) 穩定,可正式點樣。點樣後的固定時間以24-48h為(wei) 宜。時間過長或過短均會(hui) 導致熒光測量值偏低。使用1%BSA封閉緩衝(chong) 液的封閉效果。*的抗原一抗體(ti) 特異性結合反應溫度為(wei) 37 0C、時間為(wei) 2h,選擇1mg/ml作為(wei) *的點樣濃度。

綜合評價(jia) ,戊二醛修飾的蛋白質芯片優(you) 於(yu) 多聚賴氨酸修飾芯片,醛基修飾的蛋白質芯片用於(yu) 科研和研究蛋白質檢測是可行的,這為(wei) 蛋白質芯片的應用開發提供選擇的依據但應當探討如何降低醛基修飾芯片的背景這對於(yu) 提高蛋白質芯片的敏感性和信噪比,具有重要意義(yi) ,此方麵技術有待進一步探索。 第二部分:建立定量檢測科研血清IgG蛋白質芯片的技術平台。為(wei) 研製定量檢測科研血清IgG蛋白質芯片,選擇醛基修飾的城片為(wei) 載體(ti) ,蛋白質樣品溶解於(yu) 20%甘油的PBS,由機械手將濃度為(wei) 0.5 mg/ml人IgG單克隆抗體(ti) 點樣在玻片上,科研血清白蛋白為(wei) 陰性對照,以1%的BSA為(wei) 封閉液對蛋白質芯片進行封閉,並經相應處理,構建用於(yu) 定量檢測科研血清lgG蛋白質芯片。以IgG標準品為(wei) 檢測對象,建立蛋白質芯片方法和ELISA方法的標準曲線,分別用蛋白質芯片方法和ELISA方法檢測10例科研血清IgG。將純化的羊抗人IgG 0.5mg/ml 30%甘油/PBS,點樣在經硝酸纖維素修飾的片基上,以科研血清白蛋白為(wei) 陰性對照,用1%BSA封閉,製備定量檢測科研血清IgG的蛋白質芯片;同時用ELISA檢測科研血清IgG。SPSS 10.0軟件分析蛋白質芯片和ELISA的試驗結果,采用單因素方差分析兩(liang) 組間相關(guan) 性。結果顯示蛋白質芯片和ELISA校準曲線的R~2值分別是0.996和0.994。兩(liang) 種方法檢測的10例科研血清IgG含量,其檢測限均在1.56μg╱100μL。用單因素方差分析結果顯示f=0.188,P=0.670＞0.05,表明兩(liang) 組間差異無顯著性意義(yi) ,具有很好的一致性。本研究以科研血清IgG為(wei) 模型,比較蛋白質芯片與(yu) ELISA在定量分析中的效果,顯示出二者的高度相關(guan) 性。抗體(ti) 芯片的基礎在於(yu) 包被於(yu) 芯片基質上的抗體(ti) 的有效數量和活性,作為(wei) 蛋白質芯片技術中應用前景的抗體(ti) 芯片技術,在定量分析中有一定的優(you) 勢。