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更新時間:2013-12-13
瀏覽次數:1146ELISA測定方法是以抗原和抗體(ti) 分子為(wei) 測定靶標的方法,亦是目前zui為(wei) 常用的實驗室診斷方法之一。
從(cong) 理論上說,一種生物或生理活性物質,隻要有辦法得到其特異的抗體(ti) ,就可以建立這種物質的酶聯免疫測定方法。在以前看來一些難以進行質量測定的微量生物活性物質,如受體(ti) 、細胞因子以及酶等均可使用酶聯免疫測定技術來測定。酶聯免疫測定方法是以抗原抗體(ti) 間的特異反應為(wei) 基礎的,其與(yu) 生化的化學反應有著本質的區別,並且由於(yu) 標記物如同位素、酶、熒光素、微量元素、發光物質等的摻人,酶聯免疫測定技術從(cong) 低靈敏的免疫沉澱和免疫凝集反應進入到了高靈敏的放射免疫、酶免疫、熒光免疫和發光免疫測定時代,可見酶聯免疫測定更多的是用於(yu) 生物活性物質的微量測定。
目前在上,很多重要的疾病診斷標誌物均使用酶聯免疫測定方法來檢測,如抗HAVIgM,乙肝“兩(liang) 對半”、抗HCV,抗HIV,梅毒抗體(ti) 、優(you) 生優(you) 育TORCH係列、性病病原體(ti) 的抗原或抗體(ti) 等傳(chuan) 染性病原體(ti) 血清標誌物、激素、腫瘤標誌物、自身抗體(ti) 、特種蛋白、細胞因子和治療藥物以及HBVDNA,HCV-RNA,遺傳(chuan) 病基因、腫瘤基因、基因突變等,這些標誌物的檢測質量直接關(guan) 係到患者的診斷和治療。
而在血站,HBsAg,抗HCV,抗HIV和梅毒抗體(ti) 等標誌物的檢測,哪怕是1%的錯誤,對將要接受輸血的特定患者來說,就是100%的災難。近期,在電視、報紙等新聞媒體(ti) 中,常可見到一些有關(guan) 醫患糾紛的報道,其中一些就與(yu) 酶聯免疫測定有關(guan) ,如輸血後丙肝病毒、艾滋病毒感染的發生,性病檢測的假陽性等。可見,酶聯免疫測定的質量控製有多麽(me) 重要。
酶聯免疫吸附測定法-ELISA的應用
ELISA應用的範圍很廣,而且正在不斷地擴大,原則上ELISA可用於(yu) 檢測一切抗原、抗體(ti) 及半抗原,可以直接定量測定體(ti) 液中的可溶性抗原。酶免疫試驗(EIA)結合光學顯微鏡或電子顯微鏡可進行抗原定位與(yu) 結構的研究,用酶標記抗原或抗體(ti) 結合免疫擴散及免疫電泳可提高試驗的敏感性。在實際應用方麵可作疾病的研究診斷、疾病監察、疾病普查、法醫檢查、獸(shou) 醫及農(nong) 業(ye) 上的植物病害的診斷檢定等。因此,它和生物化學、免疫學、微生物學、藥理學、流行病學及傳(chuan) 染病學等方麵密切相關(guan) 。檢查抗原和半抗原方麵:在內(nei) 分泌方麵已經用於(yu) 檢測雌性激素、絨毛膜促性腺激素、黃體(ti) 素、胰島素、皮質醇、促甲狀腺素和孕酮等,其敏感性與(yu) RIA相當,在血液學方麵可用於(yu) 檢查凝固因子(如第Ⅷ凝固因子)、紅細胞抗原及結合球蛋白(HaptoGlobin)等,在腫瘤方麵已試用檢查甲胎蛋白(AFP)癌胚抗原(CEA),對前者的敏感性已達到與(yu) 放射免疫試驗相當的水平,但對CEA檢查的敏感性較低,目前尚不能用於(yu) 常規診斷,在傳(chuan) 染病的診斷方麵正在日益擴大,其中zui滿意的是用於(yu) 檢查乙型肝炎表麵抗原。國內(nei) 外已有ELISA檢測的商品供應。尚有用於(yu) 檢查霍亂(luan) 弧菌、大腸肝菌、綠膿杆菌和破傷(shang) 風梭菌毒素;腦膜炎球菌及淋球菌抗原;檢查免疫抑製樣本中常見的白色念殊菌抗原,檢查樣本或病獸(shou) 的糞便中的輪狀病毒,自樣本標本中檢查甲肝病毒、皰疹病毒、麻疹病毒、流感、呼吸道融合及巨細胞病毒等。還可用於(yu) 植物組織漿液中檢查植物病毒。此外尚試用於(yu) 測鉤體(ti) 抗原及血吸蟲病的循環抗原等。在免疫化學方麵可用於(yu) 檢測白蛋白,免疫球蛋白的各種組份,也可用於(yu) 檢測補體(ti) 成份,如:ciq,還能用於(yu) 檢測蛇毒。