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該試劑盒檢測範圍: 2.5 pmol/L -80 pmol/L
操作步驟如下:
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀 釋。
80 pmol/L | 5 號標準品 | 150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
40 pmol/L | 4 號標準品 | 150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
20 pmol/L | 3 號標準品 | 150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
10 pmol/L | 2 號標準品 | 150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
5 pmol/L | 1 號標準品 | 150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其餘(yu) 各步操作相同)、標準孔、 待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然後再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為(wei) 5 倍)。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板後置 37℃溫育 30 分鍾。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋後備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體(ti) ,甩幹,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒後棄去,如此
重複 5 次,拍幹。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鍾.
10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液後 15 分鍾以內(nei) 進行。
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