PRODUCT CLASSIFICATION
產品分類
市場上的胎牛血清種類繁多,魚龍混雜,很多科研工作者,特別是剛接觸細胞培養(yang) 的人,難以分辨血清質量的優(you) 劣。根據我司資深專(zhuan) 家十多年來血清生物試劑和銷售的經驗,總結如下:
一、外觀
拿到血清,zui先接觸的是血清外觀,對於(yu) 缺少細胞培養(yang) 經驗的人來說,外觀的判斷尤為(wei) 重要
1、顏色
根據血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現出黃色或紅色,我國的細胞培養(yang) 用血清標準是不高於(yu) 20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清並無直接影響,這個(ge) 指標的意義(yi) 在於(yu) 能體(ti) 現出采血過程的嚴(yan) 謹規範程度,良好的操作能降低血清的溶血。
國產(chan) 血清的采血點很分散,大多是由屠戶采血後馬上離心收集,所以很少會(hui) 有溶血,表現出明亮的蠟黃色,當然,國產(chan) 血清也很少有標準意義(yi) 上的胎牛血清。
進口胎牛血清或多或少總有點溶血,因為(wei) 真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂。
總的來說,國產(chan) 的血清呈現出蠟黃。進口的血清,質量的呈現出談黃、微紅色,如Gibco 16000,差點的呈現出橘紅色或鮮紅色。當然,熱滅活血清或保存不當的血清,由於(yu) 血紅蛋白的破壞氧化,會(hui) 呈現出暗紅,甚至咖啡色。
2、沉澱
很多血清客戶,會(hui) 發現進口血清有沉澱,從(cong) 而懷疑血清的質量問題,這是沒有根據的。
血清中的沉澱是由纖維蛋白的凝聚產(chan) 生,對血清質量沒有任何影響,沉澱的產(chan) 生原因很多,和廠家的加工生物試劑方式密切相關(guan) 。
國產(chan) 的血清,大多來自北方,由於(yu) 價(jia) 格低廉,保存環境都不好,從(cong) 采血、冷凍、運輸到生物試劑會(hui) 經過多次凍融,每次凍融過程,就會(hui) 析出部分纖維蛋白沉澱,這樣,血清成品過濾後看起來反而更加的“幹淨”,很少有沉澱產(chan) 生。
進口的胎牛血清,過濾分裝前很少會(hui) 反複凍融,生物試劑後的成品也是清澈的,但隨著時間的推移,血清中的大量纖維蛋白會(hui) 析出形成沉澱。當然,進口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生物試劑後血清可能會(hui) 渾濁,甚至有大量沉澱。
當然,購買(mai) 回來的血清都是冰凍狀態,使用時需要融化,融化過程在溫度較低的狀態下慢慢進行,否則沉澱相對較多,雖然沉澱並不直接影響血清的質量,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。
3、澄清度
進口胎牛血清由於(yu) 蛋白和脂類等物質含量低,表現為(wei) 稀薄、清淡,而國產(chan) 血清,因為(wei) 絕大多數是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,這對於(yu) 初步接觸血清的人很難判斷,但把兩(liang) 者進行對比,可容易分辨。
二、主要技術指標
目前國內(nei) 血清的質量標準是2005版的《中華人民共和國藥典》,主要指標有以下幾點:
1、內(nei) 毒素
標準為(wei) 不高於(yu) 5EU/ml。內(nei) 毒素是細菌破碎後細胞壁的成分,因此內(nei) 毒素含量的高低可表現出采血到生物試劑一係列過程中的無菌操作情況。目前,國產(chan) 血清基本都能達到這一要求,很多進口胎牛血清內(nei) 毒素含量反而更高,如Gibco 26140,隻要求不高於(yu) 50EU/ml,高出我國標準10倍,即使是16000,也要10EU/ml,血清質量也未見影響。可見,內(nei) 毒素含量偏高不影響質量,除非含量*,預示著已經汙染。
2、總蛋白含量
胎牛血清一般範圍是30-40mg/ml,數值偏高,說明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數值偏低,表明血清可能摻水了。
3、血紅蛋白
標準為(wei) 不高於(yu) 20mg/dl,顏色越紅,數值越高,反之,數值越低。
4、pH
國產(chan) 血清,大多高於(yu) 7.5,進口胎牛血清,大多低於(yu) 7.5,具體(ti) 原因未知,可能和牛齡有關(guan) ,這也能用來初步鑒別血清的來源。
5、微生物
包括細菌、黴菌、支原體(ti) 、噬菌體(ti) 、各類病原性病毒等。隨著國內(nei) 血清廠家生物試劑條件的改善提高,細菌、黴菌等“大型”微生物幾乎能100%控製,支原體(ti) 經過0.1um過濾,大多也能清除。大腸杆菌噬菌體(ti) 的汙染還是比較嚴(yan) 重的,主要是生物試劑環境過程中帶入,又無法過濾,很難*清除,但對血清質量影響不大。病原性病毒,特別是BVDV,在國產(chan) 血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產(chan) 血清質量的重要因素之一,而進口胎牛血清中基本都控製的很好。
6、免疫球蛋白
國產(chan) 血清的隻是定性檢測,結果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能*體(ti) 現出采血的時的牛齡情況,國產(chan) 血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chan) 生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。
7、其它
不管是國產(chan) 還是進口血清,都是不測抗生素的(無四環素胎牛血清除外)。國外,抗生素的使用很嚴(yan) 格,用量也很少,每頭奶牛的產(chan) 品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內(nei) ,抗生素的濫用已成了普遍現象,血清中殘留很高,對細胞培養(yang) 極為(wei) 不利,這是國產(chan) 血清質量差的根本原因。
三、血源
市場上的血清血源主要分為(wei) 中國、北美、南美和澳洲。
1、國產(chan) 血清質量差,這是*的,主要原因並不是生物試劑廠家的責任,而是天然環境差和抗生素的大量使用。國內(nei) 環境汙染嚴(yan) 重,同時飼養(yang) 過程中抗生素極其濫用,有毒有害物質會(hui) 大量殘留在血清中,zui終不利於(yu) 細胞的生長。
2、南美血清,來源很多,如Bioind的巴拿馬、Gibco的烏(wu) 拉圭、巴西等,這些血清由於(yu) 采血的不可控性,質量參差不齊,當然,相對於(yu) 國內(nei) 血清來說好的多。另外,國內(nei) 銷售的南美血清大多顏色鮮紅,如Bioind、Gibco、Hyclone等品牌,但阿根廷的血清例外,這可能和各國的采血、生物試劑工藝有關(guan) 。
3、北美血清,主要來自美國和加拿大,如Hyclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的16000-044、26140-079等。這類血清,等級越高的顏色越淡,表現為(wei) 淡黃中帶一點微紅,SH30070和SH30396對比就很明顯,特級胎牛血清基本就能進行幹細胞培養(yang) 。北美血清還有一個(ge) 顯著特點就是每瓶血清都能溯源,這對一些大型的疫苗廠、藥廠尤為(wei) 重要。
4、澳洲血清,來源主要是新西蘭(lan) 和澳大利亞(ya) ,這是在北美血清禁運之後進入中國市場的,一般不具有溯源功能,由於(yu) 生物試劑、運輸等原因,價(jia) 格相對來說比較貴。拿Gibco的10099和16000相比較,後者質量等級更高,顏色更淡,性價(jia) 比更高。