上海信帆生物進行酶聯免疫試劑盒（ky体育在线登陆）知識培訓

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大家在做elisa實驗的時候，難免會(hui) 遇到不同的問題，比如標準曲線不好，試劑盒的

回收率，假陰性，假陽性，實驗的重複性不好等等。現在我們(men) 就來一一解答用戶朋友們(men) 在實驗過程中遇到的各種疑問！
 
曲線問題：
 
1.OD值不正常：試劑盒未回溫，試劑盒回溫到25℃
                            溫度控製不好，控製正確溫度
                           孵育時間不準確，控製孵育時間
                          洗滌時衝(chong) 擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數增 加，洗滌4-5次，每孔250ul，然後拍幹
                        陽光直射，對著風直接吹，避風避光
                        酶標儀(yi) 的波長錯誤，酶標儀(yi) 的波長450nm
                       抗體(ti) 的稀釋錯誤，正確的稀釋抗體(ti)
                        水質問題，用娃哈哈礦泉水代替
 
2.白   板：洗滌液配製錯誤，正確的配製洗滌液
             少加液體(ti) （錯加液體(ti) ），正確的步驟加液體(ti)
           
 
3.無 梯 度：標準品也汙染，換標準品點板
                     OD值不正常，控製溫度時間在做一次
                    人為(wei) 點板，不要點板/
4.線 性 不 好：OD值不正常，控製溫度時間在做一次
                         
 
回收率：

1.空白管陽性高：樣本本身就是陽性樣本，換陰性樣本做回收率
                             空白管在實驗中被汙染，實驗中防止交叉汙染
                           水質原因用，娃哈哈礦泉水代替
 
 
2.偏  高：添加量不準確，的添加量
          添加濃度不適合，添加合適的濃度
           取液吹幹量多，準確的取液吹幹
           取到其它相層液體(ti) ，取需用相吹幹
           複溶液未稀釋或加入量少，正確的稀釋複溶液
 
3.偏  低：添加量不準確，的添加量
          添加濃度不適合，添加合適的濃度
          取液吹幹量少，準確的取液吹幹
           複溶液稀釋錯誤或加入量多，正確的稀釋複溶液
          

 
 
假陰、陽性：
1，水質原因：點複溶液驗證，用娃哈哈礦泉水代替
2，實驗操作原因： 吸取到其它相吹幹，準確的取液吹幹
                  離心不*，延長離心時間
                  樣本的汙染，更換樣本
                  乳化未處理*，溫浴（70℃）處理乳化現象
3，儀(yi) 器試劑原因：離心管未清洗幹淨，正確的洗滌器具
                  有機溶劑的影響，做試劑空白看影響結果
4，衍生化試劑原因（長時間衍生化試劑變質）,更換衍生化試劑
5，與(yu) 曲線好壞相關(guan) ,，保證曲線的正常
 
 
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