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生化樣本準備方法及要求

更新時間:2024-05-07      瀏覽次數:535

生化樣本準備方法及要求:

以下所有樣本必須盡量新鮮!

1、動植物組織樣本(幹冰運輸)

準確稱取動物組織重量按重量(mg):體(ti) 積(μL=1:9的比例加入9倍體(ti) 積的勻漿介質(推薦0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,研磨儀(yi) 勻漿,製備成10%的勻漿液,2500~3000rpm/min,離心10min,取上清液進行測定。

2、血清樣本(幹冰運輸)

全血標本請於(yu) 室溫放置2h內(nei) 或4℃過夜後於(yu) 4 3000rpm/min離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,並將標本放於(yu) -20℃或-80℃保存,但應避免反複凍融。解凍後的樣本應再次離心,然後檢測。

3、血漿樣本(幹冰運輸)

1.生化、ELISA:可用肝素作為(wei) 抗凝劑,標本采集後30分鍾內(nei) 於(yu) 4℃ 3000rpm/min離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,並將標本放於(yu) -20℃或-80℃保存,但應避免反複凍融。解凍後的樣本應再次離心,然後檢測。

2.凝血四項:抽取靜脈血,按照9份靜脈血、1份抗凝劑的比例加入到3.8%(或3.2%)的枸櫞酸鈉抗凝管中,輕輕顛倒10次使之充分混勻,不得有凝塊,不得形成泡沫。

3.采樣後應盡快分離血漿(60分鍾內(nei) 進行),將標本以3000rpm/min離心10-15min,使血漿分層,取上層血漿。

4.分離後的血漿-20℃以下密封可保存2周。幹冰運輸。

4、細胞樣本

貼壁細胞:將細胞用PBS衝(chong) 洗2次後,用細胞刮將細胞小心刮下來,將培養(yang) 液3000rpm/min,離心10min。棄上清留細胞沉澱,幹冰運輸。

懸浮細胞:將培養(yang) 液3000rpm/min,離心10min。棄上清留細胞沉澱,幹冰運輸。

細胞上清:標本於(yu) 4℃,3000rpm/min離心15min取上清,上清立即用於(yu) 實驗,或分裝後於(yu) -20℃或-80℃保存。避免反複凍融。


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