蛋白質羰基含量測試盒的實驗注意點

蛋白質羰基含量測試盒的實驗注意點

（紫外比色法）

一、試劑組成和配製（50 管/24 樣，貨號 A087-1-1）：

試劑一：勻漿介質，無色透明液體(ti) ，50mL×1 瓶；4℃保存；

試劑二：淺磚紅色液體(ti) ，2.5mL×1 瓶；4℃避光保存；

試劑三：黃色液體(ti) ，10mL×1 瓶；4℃避光保存；

試劑四：無色液體(ti) ，10mL×1 瓶；4℃保存；

試劑五：無色液體(ti) ，30mL×1 瓶；4℃保存；

試劑六：無色液體(ti) ，70mL×1 瓶；4℃保存；

自備試劑：無水乙醇（分析純）；乙酸乙酯（分析純）；

洗滌液的配製：將無水乙醇和乙酸乙酯按照體(ti) 積比 1︰1

的比例混合配置成溶液，現用現配；

二、試劑組成和配製（100 管/48 樣，貨號 A087-1-2）：

試劑一：勻漿介質,無色透明液體(ti) ，100mL×1 瓶；4℃保存；

試劑二：淺磚紅色液體(ti) ，5mL×1 瓶；4℃避光保存；

試劑三：黃色液體(ti) ，20mL×1 瓶；4℃避光保存；

試劑四：無色液體(ti) ，20mL×1 瓶；4℃保存；

試劑五：無色液體(ti) ，60mL×1 瓶；4℃保存；

試劑六：無色液體(ti) ，70mL×2 瓶；4℃保存；

自備試劑：無水乙醇（分析純）；乙酸乙酯（分析純）；

洗滌液的配製：將無水乙醇和乙酸乙酯按照體(ti) 積比 1︰1

的比例配置成混合溶液，現用現配；

三、操作步驟：

1、血清(漿)前處理：取血清或血漿原液進行測定(同時用

雙縮脲試劑盒（本所有售,貨號 A045-1）測定血清（漿）

中總蛋白濃度)；

2、組織樣本前處理：準確稱取組織重量,按重量(g):體(ti) 積

(mL)=1︰9 的比例加入 9 倍的試劑一(如準確稱取組織

重量 0.1g 加入 0.9mL 的試劑一)，冰水浴條件下機械勻

漿，2500 轉/分,離心 10min，取上清即 10%勻漿 450µL，

加入 50µL 試劑二，混勻，室溫放置 10min 後，

11000r/min

離心 10min，取上清按操作表測定(同時取部分上清用考

馬斯亮藍試劑盒（本所有售,貨號 A045-2）測定勻漿的

總蛋白濃度)；

四、測定意義(yi) ：

一種檢測蛋白質羰基含量的試劑盒。可簡便、靈敏的

檢測各種組織器官、血清、培養(yang) 細胞（做法同組織樣本）

和細胞器等蛋白質羰基含量。其使用不需要昂貴的設備，

樣品處理簡單，可廣泛應用於(yu) 各種疾病如衰老、動脈硬化

症，糖尿病和帕金森綜合症、風濕性關(guan) 節炎等疾病的早期

診斷，抗氧化保健食品、抗氧化藥物和化妝品等的評價(jia) ，

還可以用於(yu) 評價(jia) 由於(yu) 一些環境有害因子如輻射、化學毒物

等對機體(ti) 造成的氧化損傷(shang) 。

五、實驗注意點：

1、在用無水乙醇乙酸乙酯混合應用液對反應沉澱進行洗

滌時，漩渦混勻一定要劇烈充分，混勻時間不得少於(yu) 一

分鍾，反應沉澱物必須洗滌至白色，如果沉澱物還有黃

色殘留，適當增加無水乙醇乙酸乙酯混合應用液的洗滌

次數，以保證洗滌充分，否則會(hui) 使得測定結果偏高；

2、在進行蛋白質羰基測定時，離心的轉速不可以隨意降

低，否則會(hui) 使得測定結果偏高；

3、在進行蛋白質羰基測定時，建議使用圓底的離心管進

行實驗，這樣在進行無水乙醇乙酸乙酯混合應用液洗滌

時，可以保證沉澱被充分洗滌。不建議使用尖底的離心

管進行實驗。

蛋白質羰基含量測試盒的實驗注意點