化學發光法生物素標記核酸檢測試劑盒現貨供應

化學發光法生物素標記核酸檢測試劑盒現貨供應，歡迎大家！

如果您對該產(chan) 品感興(xing) 趣，歡迎ky体育亚洲杯！

化學發光法生物素標記核酸檢測試劑盒

化學發光法生物素檢測試劑盒(Chemiluminescent Biotin-labeled Nucleic Acid Detection Kit)是一種通過Streptavidin-HRP及後續的BeyoECL Moon試劑來實現化學發光檢測Biotin標記核酸的檢測試劑盒。適用於(yu) Southern blot、Northern blot、ribonuclease protection assay (RPA)或EMSA等實驗中，采用生物素標記的DNA或RNA探針時的檢測。本試劑盒不適用於(yu) 生物素標記蛋白的檢測。
      本試劑盒同時還提供了封閉液、洗滌液等檢測時所需的配套試劑。
      本試劑盒采用了高質量的Streptavidin-HRP Conjugate，HRP和Streptavidin共價(jia) 交聯的比例大於(yu) 3，這樣比采用
Streptavidin和Biotin-HRP conjugate兩(liang) 種試劑進行檢測要更方便，並且靈敏度更高。
      采用了非特異性結合比avidin更低的strepatavidin，使檢測結果背景更低靈敏度更高。
      本試劑盒沒有提供生物素探針標記相關(guan) 的試劑，生物素標記的DNA探針或EMSA探針的製備可以相應地使用本公司提供的的生物素3'末端DNA標記試劑盒或EMSA探針生物素標記試劑盒。
      本試劑盒可以用於(yu) 檢測至少10塊10 x 10cm有生物素標記EMSA探針的膜，即共1000cm²。

化學發光法生物素標記核酸檢測試劑盒現貨供應

如果您對該產(chan) 品感興(xing) 趣，歡迎ky体育亚洲杯！

包裝清單：

使用說明：

1. 在使用Biotin標記探針的情況下，完成Southern、Northern雜交及後續洗滌後，或RPA的轉膜和交聯後，或EMSA的轉膜和交聯後，可以使用本試劑盒開始檢測。下麵的檢測過程中溶液的用量是用於(yu) 一片10x10cm膜的量。如果膜較大或較小，各溶液的用量可以按比例放大或縮小。

2. 37-50℃水浴溶解封閉液和洗滌液。

注意：封閉液和洗滌液必須*溶解後方可使用，封閉液和洗滌液可以在室溫至50℃之間使用，但必須確保這兩(liang) 種溶液中均無沉澱產(chan) 生，在冬天需特別注意。

3. 取一合適的容器加入15ml封閉液，再放入交聯過的含有樣品的尼龍膜。在側(ce) 擺搖床或水平搖床上緩慢搖動15分鍾。

4. 取7.5μl Streptavidin-HRP Conjugate加入到15ml封閉液中(1:2000稀釋)，混勻備用。

5. 去除封閉液，加入上一步中配製的15ml含有Streptavidin-HRP Conjugate的封閉液。在側(ce) 擺搖床或水平搖床上緩慢搖動15分鍾。

6. 取25ml 洗滌液(5X)，加入100ml重蒸水或Milli-Q級純水，混勻配製成125ml洗滌液。

7. 將尼龍膜轉移至另一裝有15-20ml洗滌液的容器內(nei) ，漂洗1分鍾。

8. 去除洗滌液，加入15-20ml洗滌液，在側(ce) 擺搖床或水平搖床緩慢上洗滌5分鍾。

9. 重複步驟8三次(共洗滌四次)，每次洗滌時間均約為(wei) 5分鍾。

10. 將尼龍膜轉移至另一裝有20-25ml檢測平衡液的容器內(nei) ，在側(ce) 擺搖床或水平搖床上緩慢搖動5分鍾。

11. 取5ml BeyoECL Moon A液和5ml BeyoECL Moon B液混勻，配製成BeyoECL Moon工作液。注意：BeyoECL Moon工作液必須現配現用。說明：從(cong) 本步驟起操作方法和注意事項同Western實驗的熒光檢測。

12. 取出尼龍膜，用吸水紙吸去過多液體(ti) 。立即將膜的樣品麵向上，放置到處於(yu) 水平桌麵上的潔淨容器內(nei) 或保鮮膜上。

13. 在尼龍膜的表麵小心加上步驟11配製好的共10ml BeyoECL Moon工作液，使工作液*覆蓋尼龍膜。室溫放置2-3分鍾。

14. 取出尼龍膜，用吸水紙吸去過多液體(ti) 。將尼龍膜放在兩(liang) 片保鮮膜或其它適當的透光薄膜中間，並固定於(yu) 壓片暗盒(也稱片夾)內(nei) 。

15. 用X光片壓片1-5分鍾。可以先壓片1分鍾，立即顯影定影，然後根據結果再調整壓片時間；也可以直接分別壓片30秒、1、3、5分鍾或更長時間，然後一起顯影定影觀察結果。

如果您對該產(chan) 品感興(xing) 趣，歡迎ky体育亚洲杯！

常見問題：

1. 背景較高。

可能是由於(yu) 封閉液或洗滌液中出現沉澱或混濁。解決(jue) 方法是參考使用說明，加熱封閉液和洗滌液使封閉液和洗滌液*溶解。

2. 出現斑點狀背景。

可能是由於(yu) 過長時間存放導致Streptavidin-HRP Conjugate中出現沉澱，解決(jue) 方法是12000-14000g離心1分鍾再吸取近液麵的Streptavidin-HRP Conjugate。轉膜時有氣泡也會(hui) 導致斑點狀背景產(chan) 生，解決(jue) 方法是轉膜時膠、膜、濾紙之間確保沒有氣泡。

3. 沒有條帶或信號很弱。

A. 探針標記效率太低，解決(jue) 方法是檢測探針標記效率，確保探針的標記效率較高。

B. 探針用量不足或樣品量不足，解決(jue) 方法是加大探針用量或加大樣品用量。

C. 樣品中待檢測的核酸降解，解決(jue) 方法是檢測待檢測的核酸樣品是否出現降解，如降解則須製備新的樣品。

D. 轉膜效果不佳，解決(jue) 方法是檢查轉膜的方法和步驟，使用預染的標準品作為(wei) 轉膜的對照。

E. 選擇了不適當的膜，盡管不少情況下硝酸纖維素膜也可以完成檢測，請優(you) 先選擇帶正電荷的尼龍膜。

F. 檢測過程中膜幹掉了，解決(jue) 方法是確保檢測過程中膜可以被液體(ti) 覆蓋或始終保持濕潤。

G. 沒有交聯或交聯效果不佳，解決(jue) 方法是進行適當的交聯，如果交聯效果不佳則須檢測交聯的效率。

H. 洗滌液(5X)沒有稀釋就直接使用，請把洗滌液(5X)稀釋至1X後再使用。

I. X光片曝光時間不足，解決(jue) 方法是適當延長曝光時間。

保存條件：
      3308-3 Streptavidin-HRP Conjugate在-20℃保存，其餘(yu) 可4℃保存。如果長期不用，整個(ge) 試劑盒可-20℃保存，-20℃可以保存更長時間。
      本產(chan) 品於(yu) 專(zhuan) 業(ye) 人員的科學研究用，不得用於(yu) 研究診斷或治療，不得用於(yu) 食品或藥品，不得存放於(yu) 普通住宅內(nei) 。
      為(wei) 了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。

化學發光法生物素標記核酸檢測試劑盒現貨供應

如果您對該產(chan) 品感興(xing) 趣，歡迎ky体育亚洲杯！