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更新時間:2018-02-28
瀏覽次數:1581質控菌種-鼠李糖乳杆菌 ATCC7469 震撼上市啦!
微生物檢測凍幹質控菌種使用說明書(shu)
1 複蘇菌種前應準備適於(yu) 該菌種生長的固體(ti) 、液體(ti) 培養(yang) 基和培養(yang) 設備,所有操作均應在符合生物安全保護及無菌條件下進行。
2 啟開菌種前,用75%酒精棉消毒西林瓶表麵。在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開塑蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞,加入0.3mL左右的配套液體(ti) 培養(yang) 基,用無菌滴管反複吹吸,將凍幹菌種溶解成為(wei) 懸液,然後用無菌滴管或接種環移至斜麵、平板或液體(ti) 培養(yang) 基,並連同剩餘(yu) 菌懸液的西林瓶一起放置於(yu) 36℃培養(yang) 箱中進行培養(yang) 。(菌種與(yu) 培養(yang) 和保存方法對應表見附表1,培養(yang) 基、培養(yang) 方法和傳(chuan) 代保存方法見附表2)。
3 次日觀察菌種的生長情況,如未生長,應繼續培養(yang) 24h,或吸取培養(yang) 之後的菌懸液中再次接種培養(yang) 基,培養(yang) 24h觀察。
4 菌株為(wei) 一次性使用品,開啟之後不能反複使用或保存,暫不開啟的菌種應在4℃保藏。
5 複蘇後的菌種在傳(chuan) 1-2代後使用,建議菌種使用5代後棄用。
注):購買(mai) 後請盡量及時使用凍幹菌種,如發現菌種不活或汙染等情況,請在購買(mai) 之日起1個(ge) 月內(nei) 與(yu) 我們(men) 。
凍幹菌種複蘇示意圖:
附表2 培養(yang) 基、培養(yang) 條件和保存方法
質控菌種-鼠李糖乳杆菌 ATCC7469 震撼上市啦!
方法1:
無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍幹菌粉中加入腦心浸液培養(yang) 基,充分懸浮後取適量的菌懸液於(yu) 營養(yang) 瓊脂(022020)斜麵上35-37℃劃線培養(yang) 24-48h。斜麵(*代)放於(yu) 4℃冰箱保存,每個(ge) 月轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代後菌種應銷毀。
方法2:
無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍幹菌粉中加入腦心浸液培養(yang) 基,充分懸浮後取適量的菌懸液於(yu) 營養(yang) 瓊脂(022020)斜麵上劃線35-37℃培養(yang) 24-48h。斜麵(*代)放於(yu) 25℃下保存,每個(ge) 月轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代後菌種應銷毀。
方法3:
無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍幹菌粉中加入腦心浸液培養(yang) 基,充分懸浮後取適量的菌懸液於(yu) 血平板(024070)後塗布,35-37℃培養(yang) 24-48h。平板(*代)放於(yu) 4℃冰箱保存,並用封口膜或其它封條密封平板,每半個(ge) 月轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代後菌種應銷毀。
方法4:
無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍幹菌粉中加入腦心浸液培養(yang) 基,充分懸浮後取適量的菌懸液於(yu) 胰蛋白腖大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE)(026020)斜麵上 35-37℃培養(yang) 24-48h。斜麵(*代)放於(yu) 4℃冰箱保存,每個(ge) 月轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代後菌種應銷毀。
方法5:
無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍幹菌粉中加入腦心浸液培養(yang) 基,充分懸浮後取適量的菌懸液於(yu) 皰肉牛肉粒肉湯(027140)加液體(ti) 石蠟1cm,35-37℃培養(yang) 48-72h。肉湯(*代)放於(yu) 4℃冰箱環境下保存,每半個(ge) 月轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代後菌種應銷毀。
方法6:
無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍幹菌粉中加入堿性蛋白腖水,充分懸浮後取適量的菌懸液於(yu) 堿性瓊脂(025040)斜麵上35-37℃培養(yang) 24-48h。斜麵(*代)放於(yu) 25℃下保存,每個(ge) 月轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代後菌種應銷毀。
方法7:
無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍幹菌粉中加入3%NaCl堿性蛋白腖水,充分懸浮後放置於(yu) 36℃下複蘇8-12小時。取適量的菌懸液於(yu) 3%NaCl營養(yang) 瓊脂(營養(yang) 瓊脂(022020)加入2.5gNaCl/100mL)斜麵上35-37℃培養(yang) 24-48h。斜麵(*代)放於(yu) 25℃下保存,每個(ge) 月轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代後菌種應銷毀。
方法8:
無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍幹菌粉中加入沙氏液體(ti) 培養(yang) 基,充分懸浮後取適量的菌懸液於(yu) 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)(021050)斜麵25-28℃培養(yang) 2-5天。斜麵(*代)放於(yu) 4℃冰箱保存,每兩(liang) 個(ge) 月轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代後菌種應銷毀。
方法9:
無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍幹菌粉中加入布氏肉湯,充分懸浮後取適量的菌懸液於(yu) 血平板(024070)42±1℃微需氧條件下培養(yang) 48-72h。平板(*代)放於(yu) 4℃冰箱微需氧環境下保存,並用封口膜或其它封條密封平板,每個(ge) 星期轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代後菌種應銷毀。
方法10:
無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍幹菌粉中加入TPY肉湯,充分懸浮後取適量的菌懸液於(yu) BBL瓊脂(027330)斜麵厭氧環境下35-37℃培養(yang) 48h-72h。斜麵(*代)放於(yu) 4℃冰箱厭氧環境下保存,每個(ge) 星期轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代後菌種應銷毀。
質控菌種-鼠李糖乳杆菌 ATCC7469 震撼上市啦!