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文章標題《載血管生長因子殼聚糖納米粒在防治放射性皮膚損傷(shang) 中的應用及其作用機製的探討》

文章中引用我司試劑盒如下：

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文章詳細內(nei) 容如下：

目的:製備載有血管生長因子的殼聚糖納米粒並探討其在放射性皮膚損傷(shang) 中的應用及其作用機

製。方法:(1)大鼠臀部接受45Gy X射線照射建立放射性皮膚損傷(shang) 模型,觀察大鼠輻射區的大體(ti) 改

變和微循環狀態隨時間的變化。(2)將血管內(nei) 皮生長因子(vascular endothelial growth

factor,VEGF)、堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、肝細胞生長

因子(hepatocyte growth factor,HGF)分別局部皮下注射應用於(yu) 放射性皮膚損傷(shang) 大鼠模型,對比

大鼠模型的大體(ti) 觀、微血管計數及一步法TUNEL凋亡染色,篩選出治療效果*的血管生長因

子。(3)三聚磷酸鈉(tripolyphosphate,TPP)、殼聚糖(chitosan,CS)與(yu) 篩選出的血管生長因子結

合,離子交聯法製備成納米粒,檢測其理化性質,探討其體(ti) 外釋放規律。(4)將配製成的載血管生長

因子殼聚糖納米粒幹燥重懸後,局部皮下注射入大鼠輻射部位,對比等量血管生長因子連續注射及

一次性注射的給藥方式,觀察電離輻射區皮膚變化,初步評價(jia) 其對放射性皮膚損傷(shang) 發生發展及愈合

的影響。(5)通過對比各組微循環狀態、血管內(nei) 皮細胞損傷(shang) 標誌物血管性血友病因子(von

Willebrand Factor,vWF)含量與(yu) 細胞凋亡蛋白caspase3表達程度,進一步探討其在放射性皮膚

損傷(shang) 中的作用機製。免疫組織化學技術(immunohistochemistry)、免疫印跡法(Western

blotting)對血管生長因子定性定量驗證。結果:(1)大鼠經45Gy X射線照射後,2周脫毛,4周皮膚

形成潰瘍,兩(liang) 個(ge) 月潰瘍創麵逐漸愈合,隨時間變化微循環障礙逐漸加重。(2)輻照後兩(liang) 周,VEGF組輻

照區未見明顯變化,而bFGF組和HGF組部分脫毛,VEGF組可見較多微血管且較少的凋亡細胞,差異

有統計學意義(yi) (P<0.01)。(3)采用離子交聯法製備的載VEGF165殼聚糖納米粒粒徑400nm左

右,Zeta電位25.3V,包封率85%左右,體(ti) 外可平穩釋放30天,釋放率達90%。(4)VEGF165以納米顆

粒的形式注射應用於(yu) 體(ti) 內(nei) 後,其脫毛、潰瘍形成所需的天數與(yu) 以連續注射的方式相當,兩(liang) 者間差異

不顯著(P>0.05),但明顯多於(yu) 對照組及一次性注射的用藥方式(P<0.01),創麵愈合所需天數較其他

三組少,差異有統計學意義(yi) (P<0.05)。(5)VEGF165以納米顆粒及連續注射的方式應用後兩(liang) 周開

始,微血管計數和vWF含量多於(yu) 對照組和一次性單純注射VEGF165組,差異有統計學意義(yi)

(P<0.01);caspase3表達程度弱於(yu) 對照組和一次性單純注射VEGF165組。經驗證,VEGF165以納

米顆粒及連續注射的方式應用後,組織內(nei) VEGF165的含量明顯多於(yu) 對照組和一次性單純注射

VEGF165組。結論:(1)當X射線放射劑量為(wei) 45Gy時,大鼠可形成明顯的皮膚損傷(shang) 創麵,微血管損傷(shang)

與(yu) 微血栓形成隨時間程度逐漸加深,具有長期性、持久性、潛在性和進行性作用的特征。

(2)VEGF165能夠有效地延緩大鼠模型放射性皮膚損傷(shang) 的發生發展。(3)離子交聯法製備的載

VEGF165殼聚糖納米粒,不僅(jin) 具有較高的包封率,而且理化性質穩定,體(ti) 外釋放平穩,並且在大鼠模

型體(ti) 內(nei) 起到了一定的緩釋作用,實現了VEGF165的可持續作用。(4)載VEGF165殼聚糖納米粒可

能是通過保護血管內(nei) 皮細胞,抑製內(nei) 皮細胞凋亡,防止血栓形成,延緩放射性皮膚損傷(shang) 的發生發展,

並且促進放射性皮膚損傷(shang) 的愈合。