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上海信帆生物:NanoLuc螢光素酶技術

更新時間:2016-05-31      瀏覽次數:3080

NanoLuc™螢光素酶是Promega公司推出一種新型的螢光素酶,它具有分子量更小(19.1kDa, 171個(ge) 氨基酸),發光更亮,比任何現有的生物發光酶用途更加廣泛的特點,它是目前性能的生物發光報告基因之一。NanoLuc™螢光素酶的這些屬性為(wei) 報告基因檢測提供了新的功能,在需要更高靈敏度的複雜生物學應用中深具潛力。

NanoLuc技術包含一種新型底物——furimazine和一種*的酶(NanoLuc™螢光素酶),前者由Promega公司有機化學家開發,後者由Promega公司的研究科學家利用定向進化技術開發。它具有*的小巧體(ti) 積,可以用於(yu) 增強的病毒傳(chuan) 遞和蛋白融合,而且它很容易從(cong) 細胞中分泌。NanoLuc™螢光素酶比螢火蟲(Photinus pyralis)或海腎(Renilla reniformis)螢光素酶的發光高兩(liang) 個(ge) 數量級,在難轉染的細胞中也能獲得更好表現。此外,NanoLuc可應用在更多相關(guan) 模型中,包括複雜的生物樣品。NanoLuc螢光素酶簡單易用——僅(jin) 需加樣-檢測,且信號穩定,可以不經任何改良,實現從(cong) 實驗台操作到高通量篩選的規模放大應用。

為(wei) 滿足在“下一代”遺傳(chuan) 報告基因中的多種應用需求,我們(men) 提供12個(ge) 版本的 NanoLuc螢光素酶質粒。產(chan) 品包括NanoLuc-PEST(NlucP),它將蛋白表達水平變化與(yu) 轉錄活性改變密切偶聯,並增加信噪比。對於(yu) 分泌型報告基因,我們(men) 通過融合N-末端分泌信號(secNluc)來製備NanoLuc螢光素酶載體(ti) 。使用Nano-Glo™螢光素酶檢測試劑,發光量在跨越1,000,000倍的濃度範圍內(nei) 呈線性關(guan) 係,且信號半衰期≥2小時。

手機拍攝的NanoLuc™螢光素酶發光信號。(注:96-孔板中, 轉染了NanoLuc™螢光素酶載體(ti) 的HEK293細胞,50000細胞/孔)

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