上海信帆生物：如何選擇合適的蛋白酶抑製劑

即使蛋白酶對細胞功能很重要，但你也有不想見到它們(men) 的時候。比如，在純化蛋白質的時候，你可不想讓蛋白酶大肆吞噬你的目標蛋白吧，特別是低豐(feng) 度蛋白。如今，市場上有多種蛋白酶抑製劑可供選擇，幫助你在必要時停止蛋白酶的活性。

為(wei) 了對付細胞和組織樣品中存在的各種蛋白酶，抑製劑的選擇也在不斷增加。目前，主要有四種類型的蛋白酶，根據他們(men) 活性位點中的氨基酸命名：絲(si) 氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶。蛋白酶抑製劑可以特異針對一種蛋白酶，也可以是廣譜的。

人們(men) 通常根據抑製劑作用的蛋白酶類型，以及它們(men) 可逆或不可逆，對蛋白酶抑製劑進行分類。如何選擇和使用？這似乎是一個(ge) 難題，光看名字就已經讓人頭暈了。下麵讓我們(men) 來聽聽專(zhuan) 業(ye) 人士的建議。

從(cong) 雞尾酒開始

蛋白酶抑製劑的選擇，取決(jue) 於(yu) 每個(ge) 用戶的個(ge) 性化實驗，不過對於(yu) 裂解細胞或勻漿組織的應用，抑製劑混合物（或者說雞尾酒）通常是個(ge) 比較保險的選擇，可阻斷不同的蛋白酶。Abbexazui的抑製劑就是兩(liang) 種混合物：Protease Inhibitor Cocktail Multipurpose以及Protease, Phosphatase & PMSF；這兩(liang) 者都適用於(yu) 裂解液。“它們(men) 普遍適用，適合許多樣品，無論是新鮮還是FFPE組織，抑或不同的物種，”Abbexa的Sabrina Calabressi談道。

若研究人員希望保留目的蛋白，同時維持細胞健康，默克密理博的Chandra Mohan也建議使用抑製劑混合物。她建議選擇針對四種蛋白酶的抑製劑，如默克密理博的Protease Inhibitor Cocktail III。它可抑製哺乳動物細胞和組織中的天冬氨酸、半胱氨酸和絲(si) 氨酸蛋白酶以及氨肽酶。

有時，不那麽(me) 特異的抑製劑似乎是個(ge) 更好的選擇。“在裂解細胞或製備組織勻漿液時，使用具有廣譜特異性的抑製劑，”Mohan說。“它們(men) 應當快速反應，與(yu) 蛋白酶不可逆結合，並在蛋白純化後輕鬆去除。”

盡管如此，選擇困難症還是圍繞著你。Abbexa認為(wei) ，嚐試不同的類型是供應商的責任，而不是研究人員的。這家公司建議你和供應商交流，讓他們(men) 將利用自己的專(zhuan) 業(ye) 知識來幫你選擇。通常，Abbexa在了解研究人員的特定分析、樣品類型和應用之後，才推薦*的抑製劑。

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