上海信帆生物：有絲分裂（Feulgen染色法）

實驗原理：細胞中的DNA受1NHC1，60℃水解作用以後，核酸中的嘌呤堿很快*被除掉，使脫氧核糖中潛在的醛基獲得自由狀態。水解後，組織要經水洗再移至希夫（Schiff）試劑中，希夫試劑即同露出來的醛基發生反應，呈現紫紅色。這個(ge) 反應是Feulgen在1942年提出來的，是DNA的一個(ge) 特異性檢查法。 
水解的時間很重要，因為(wei) 核酸的水解有兩(liang) 個(ge) 過程，*，漂呤堿很快被除掉，脫氧核糖中潛在的醛基顯露出來，第二，組蛋白和核酸愈來愈多地被除掉。在短時間的水解作用以後，*個(ge) 過程占優(you) 勢，這時候用希夫試劑染色，染色體(ti) 的染色作用zui強。隨著水解作用的繼續進行，第二個(ge) 過程逐漸變成優(you) 勢，因此水解液中的希夫反應增強，而染色體(ti) 中的希夫應減弱。zui後，第二個(ge) 過程超過*過程時，染色體(ti) 也隨之停止反應。 
希夫試劑是堿性品紅———亞(ya) 硫酸溶液，呈無色。與(yu) DNA醛基反應後，使堿性品紅恢複原來的紅色。 
二、實驗目的：觀察蠶豆根尖細胞或其它根尖細胞內(nei) 染色體(ti) 中的DNA，以及染色體(ti) 在有絲(si) 分裂中的行為(wei) ，掌握Feulgen染色方法。 
三、實驗材料：上次實驗製成了石蠟切片。 
四、實驗準備： 
1．用具 立式染色缸一套，鑷子，蓋玻片，小漏鬥，鐵架，毛邊紙，玻璃棒，顯微鏡，恒溫水浴鍋，溫度計，燒杯，棕色瓶，黑紙。 
2．玻璃器皿的清洗 主要是染色缸的清洗，一般用肥皂粉洗，用水衝(chong) 淨即可，如不能洗淨時，要用洗液浸泡後，再衝(chong) 洗，自來水洗後，再用少量蒸餾水過洗一次。盛放100%酒精、二甲苯的染色缸必須幹燥，缸蓋內(nei) 緣必須塗以幾士林，以防止蒸發和收水分，影響濃度。染色缸上要貼上標簽。 
3．實驗所需藥口及配製 
濃鹽酸（36—38%），堿性品紅，偏重亞(ya) 硫酸鈉（Na2S2O5）; 
亞(ya) 硫酸鈉（Na2SO3）,固綠（fast green），加拿大中性樹膠乙醇（30—100%），二甲苯。 
藥品配製： 
1各種濃度的乙醇配製.
21NHCI配製：取濃HCI 82.5毫升加蒸餾水至1000毫升，搖勻。 
3Sciff 試劑的配製 
0．5克堿性品紅，加到已經煮沸的100毫升蒸餾水中，再煮沸3—4分鍾，待溶液冷卻到50℃時過濾，再等溶液冷到25℃以下時，加入10毫升的1NHCI和1。5克偏重亞(ya) 硫酸鈉，裝在棕色瓶中，塞緊瓶子，用黑紙包好，放在暗處，第二天觀察，溶液還是淡紅色就不能用，隻得重配。 
偏重亞(ya) 硫酸鈉與(yu) 1NHCI反應，放出SO2，SO2與(yu) 堿性品紅反應，生成堿性品紅--亞(ya) 硫酸溶液，呈無色。 
4漂染液的配製 
先配10%的亞(ya) 硫酸鈉溶液。 
把10%亞(ya) 硫酸鈉溶液10毫升加200毫升蒸餾水，再加10毫升1NHCI，即成漂當液。 
5固綠染色液 
0.5克固綠溶於(yu) 100毫升95%乙醇溶液。 
五、實驗步驟：
水解 先在恒溫水浴箱中準備好恒溫60℃的1NHCI。注意一定要控製好溫度不能過高，高了醛基要破壞，低了小解不充分，醛基不能釋放出來。水解的時間長短要根據材料，以及固定液的種類而定。根據試驗結果，取一個(ge) 適當時間。

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