上海信帆生物：關於293/293T細胞基本信息

關(guan) 於(yu) 293/293T細胞

1、種屬都為(wei) 人，不是鼠。

2、來源：293細胞是轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞係，293T細胞由293細胞派生，同時表達SV40大T抗原，含有SV40複製起始點與(yu) 啟動子區的質粒可以複製。用Ca3(PO4)2轉染效率可高達50%。蛋白表達水平高，轉染後2-3天用堿性磷酸酶分析可較容易地檢測到表達的蛋白。瞬時轉染293T細胞是過表達蛋白並獲得細胞內(nei) 及細胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。

3、形態為(wei) 上皮細胞，能致瘤。

4、染色體(ti) 核型：亞(ya) 三倍體(ti) 人細胞係。染色體(ti) 眾(zhong) 數為(wei) 64，30%的細胞有64 條染色體(ti) 。4.2%的細胞染色體(ti) 數目更多。多數細胞der(1)t(1;15) (q42;q13), der(19)t(3;19) (q12;q13), der(12)t(8;12) (q22;p13),還有四條標記染色體(ti) ，有的細胞另有5條標記染色體(ti) 。der(1)與(yu) M8 (or Xq+)常常成對出現。N17 與(yu) N22各有四條。值得注意的是多數細胞有三條X染色體(ti) ，兩(liang) 條Xq+，一條Xp+。

5、是貼壁細胞。

6、293:棄培養(yang) 基，含0.25% 胰酶, 0.03% EDTA 消化液洗滌，棄去，加1-2ml消化液室溫或37℃消化。加入新鮮培養(yang) 基，吸出，分到新培養(yang) 皿中。一傳(chuan) 二至一傳(chuan) 四。293T:生長快，通常倍增時間不到一天 。每3~4 天1：10至1：20稀釋，5% CO2條件下培養(yang) 。細胞貼壁疏鬆，可隻用EDTA消化，不要用胰蛋白酶過度消化。每兩(liang) 到三天換液一次。

7、凍存液：95%培養(yang) 基;5%,DMSO;

8、培養(yang) 條件：ATCC培養(yang) 基：90%的MEM Eagle，加入2mM L-穀氨酰胺，1.5g/L碳酸氫鈉，0.1 mM必需氨基酸，1.0 mM 丙酮酸鈉;10%加熱滅活的馬血清37℃培養(yang) .

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