上海信帆生物：人血漿中緩激肽定量檢測方法開發

緩激肽是一種含有9種氨基酸的生理和藥理活性肽，由蛋白質的激肽基團衍生而來。激肽是可以促使血管舒張、血管通透性增強、一氧化氮釋放和花生四烯酸流動的效應因子。它是血壓、腎功能和心髒功能的重要調節因子，還參與(yu) 炎症反應。緩激肽可引起血管擴張，從(cong) 而導致血壓降低。

因此，對這種激素肽的變化進行高靈敏度、高選擇性和高準確度地定量，並將其作為(wei) 疾病進展或藥物治療的評估指標，將會(hui) 極為(wei) 有利。盡管以往都是通過配體(ti) 結合試驗(LBAs)對生物製劑進行定量分析，但在過去幾年中利用LC-MS/MS分析大分子已成為(wei) 一種趨勢。這在某種程度上是因為(wei) LBAs產(chan) 生顯著的交叉反應問題並且缺乏標準化。

LC-MS/MS具有多種優(you) 勢，例如開發時間更短、準確度和精度更高、可重複進樣，並且容易區分相似度很高的類似物、代謝物或內(nei) 源性幹擾物。常見的肽通常難以通過LC-MS/MS進行分析，這是因為(wei) 其不易離子化以及不易產(chan) 生理想的碎片離子而導致MS靈敏度較低，從(cong) 而使得LC和樣品製備方法開發非常困難。由於(yu) 緩激肽在血漿中的濃度低至pg/mL水平且代謝速度快，在采血和樣品製備過程中還可通過蛋白水解人為(wei) 生成，因此對其進行準確定量相當困難。

本研究采用了專(zhuan) 門設計的血液收集技術以防止體(ti) 外緩激肽的形成，並且利用混合型固相萃取(SPE)和實心核顆粒色譜柱，zui大限度降低並消除基質幹擾的同時提高定量分析的靈敏度。

應用優(you) 勢

■ 使用CORT ECS™ UPLC^®色譜柱有利於(yu) 獲得較窄的峰寬、改善靈敏度和分離度，並消除基質幹擾

■ 采用Oasis^®WCX(一種混合型吸附劑)的SPE方法降低了基質幹擾並提高了血漿中緩激肽提取的選擇性

■ Oasis μElution96孔板可濃縮樣品，並在zui大程度上減少肽損失，使血漿中緩激肽的檢測限達到5 pg/mL

■ 選擇性高的快速SPE提取(<30 分鍾)省去了耗時的免疫親(qin) 和純化步驟

■ Xevo^®TQ-S MS可實現與(yu) 免疫檢測方法相匹配的高靈敏度，但與(yu) 後者相比更加省時省力

■ 與(yu) 傳(chuan) 統LBA方法相比更為(wei) 準確精密

■ 分析速度快，隻需3.5分鍾，大大提高了工作效率

沃特世解決(jue) 方案

ACQUITY UPLC^®係統

Xevo TQ-S質譜儀(yi)

CORTECS UPLC C18色譜柱

Oasis WCX 96孔µElution提取板

ACQUITY^®96孔收集板

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