elisa實驗中培養基配置的基本過程

1.配製溶液

　　向容器內(nei) 加入所需水量的一部分，按照培養(yang) 基的配方，稱取各種原料，依次加入使其溶解，zui後補足所需水分。對蛋白腖、肉膏等物質，需加熱溶解，加熱過程所蒸發的水分，應在全部原料溶解後加水補足。

　　配製固體(ti) 培養(yang) 基時，先將上述已配好的液體(ti) 培養(yang) 基煮沸，再將稱好的瓊脂加入，繼續加熱至*融化。並不斷攪拌，以免瓊脂糊底燒焦。

　　2.調節pH值

　　用pH試紙（或pH電位計、氫離子濃度比色計）測試培養(yang) 基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH進行調節，直到調節到配方要求的pH值為(wei) 止。

　　3.過濾

　　用濾紙、紗布或棉花趁熱將已配好的培養(yang) 基過濾。用紗布過濾時，折疊成六層，用濾紙過濾時，可將濾紙折疊成瓦棱形，鋪在漏鬥上過濾。

　　4.分裝

　　已過濾的培養(yang) 基應進行分裝。如果要製作斜麵培養(yang) 基，須將培養(yang) 基分裝於(yu) 試管中。如果要製作平板培養(yang) 基或液體(ti) 、半固體(ti) 培養(yang) 基，則須將培養(yang) 基分裝於(yu) 錐形瓶內(nei) 。

　　分裝時，一手捏鬆彈簧夾，使培養(yang) 基流出，另一隻手握住幾支試管或錐形瓶，依次接取培養(yang) 基。分裝時，注意不要使培養(yang) 基粘附管口或瓶口，以免浸濕棉塞引起雜菌汙染。

　　裝入試管的培養(yang) 基量，視試管和錐形瓶的大小及需要而定。一般製作斜麵培養(yang) 基時，每隻15×150毫米的試管，約裝3～4毫升（1/4～1/3試管高度），如製作深層培養(yang) 基，每隻20×220毫米的試管約裝12～15毫升。每隻錐形瓶裝入的培養(yang) 基，一般以其容積的一半為(wei) 宜。

　　5.加棉塞

　　分裝完畢後，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過濾空氣，避免汙染。棉塞應采用普通新鮮、幹燥的棉花製作，不要用脫脂棉，以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。製作棉塞時，要根據棉塞大小將棉花鋪展成適當厚度，揪取手掌心大小一塊，鋪在左手拇指與(yu) 食指圈成的圓孔中，用右手食指插入棉花中部，同時左手食指與(yu) 姆指稍稍緊握，就會(hui) 形成1個(ge) 長棒形的棉塞。棉塞作成後，應迅速塞入管口或瓶口中，棉塞應緊貼內(nei) 壁不留縫隙，以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過緊過鬆，塞好後，以手提棉塞、管、瓶不下落為(wei) 合適。棉塞的2/3應在管內(nei) 或瓶內(nei) ，上端露出少許棉花便於(yu) 拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應蓋上厚紙用繩捆劄，準備滅菌。

　　6.製作斜麵培養(yang) 基和平板培養(yang) 基

　　培養(yang) 基滅菌後，如製作斜麵培養(yang) 基和平板培養(yang) 基，須趁培養(yang) 基未凝固時進行。

　　(1)製作斜麵培養(yang) 基。在實驗台上放1支長0.5～1米左右的木條，厚度為(wei) 1厘米左右。將試管頭部枕在木條上，使管內(nei) 培養(yang) 基自然傾(qing) 斜，凝固後即成斜麵培養(yang) 基。

　　(2)製作平板培養(yang) 基。將剛剛滅過菌的盛有培養(yang) 基的錐形瓶和培養(yang) 皿放在實驗台上，點燃酒精燈，右手托起錐形瓶瓶底，左手拔下棉塞，將瓶口在酒精燈上稍加灼燒，左手打開培養(yang) 皿蓋，右手迅速將培養(yang) 基倒入培養(yang) 皿中，每皿約倒入10毫升，以鋪滿皿底為(wei) 度。鋪放培養(yang) 基後放置15分鍾左右，待培養(yang) 基凝固後，再5個(ge) 培養(yang) 皿一疊，倒置過來，平放在恒溫箱裏，24小時後檢查，如培養(yang) 基末長雜菌，即可用來培養(yang) 微生物。