我國的科學家發現了高靈敏的電化學發光免疫檢測方法

傳(chuan) 統的磁免疫電化學發光(ECL)檢測方法是將磁微球用作捕獲抗體(ti) 的載體(ti) ，利用其較大的反應麵積及順磁性來實現對檢測物的快速結合與(yu) 分離。由於(yu) 單個(ge) 抗體(ti) 分子用作標記探針時表麵可修飾的基團有限，在靶標濃度很低時，標記探針數量很少，很難檢測到，這影響到靈敏度的進一步提高。

本研究將酶聯免疫吸附分析(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)在酶標板上進行的抗體(ti) 包被、封閉、抗原結合、二抗結合等程序化的操作步驟與(yu) 磁微球作為(wei) 標記探針載體(ti) 的優(you) 勢相結合，以劇毒生物毒素相思子毒素(Abrin)為(wei) 檢測對象，建立了一種高靈敏的電化學發光免疫檢測方法。實驗過程如圖所示，首先在酶標板上吸附固定相思子毒素多抗，與(yu) 相思子毒素作用後再與(yu) 生物素化的單抗結合，形成雙抗體(ti) 夾心免疫複合物，然後通過生物素-鏈黴親(qin) 和素特異相互作用連接三聯吡啶釕標記的親(qin) 和素包被磁性微球形成磁性微球免疫複合物。將複合物從(cong) 酶標板上解離後進行電化學發光檢測。

這樣，結合於(yu) 酶標板的磁微球的量即可反映Abrin 的濃度，且磁微球表麵攜帶大量標記物，可放大檢測信號，提高檢測的靈敏度。利用此方法檢測相思子毒素，濃度在2-200 ng/ L 範圍內(nei) 與(yu) 電化學發光強度呈良好的對數線性關(guan) 係，檢測限達2 ng/ L。該方法靈敏度較傳(chuan) 統方法提高兩(liang) 個(ge) 數量級，也遠高於(yu) 目前國內(nei) 外已報道的方法。該法特異性高、重現性好，可用於(yu) 痕量蛋白的高靈敏檢測，在研究診斷、環境監測、生物防護等領域有較好的應用前景。