蛋白質染色知多少，信帆生物為你答疑解惑

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染色液種類繁多，各種染色液染色原理不同，靈敏度各異。使用時可根據需要加以選擇。常用的染色液有：

1．氨基黑10B(amino black 10B又稱為(wei) amidoschwarz 10B或naphthalene blueblack，2B 200)氨基黑10B分子式為(wei) C22H13N6S3Na3，MW=715，λmax=620-630nm，是酸性染料。其磺酸基與(yu) 蛋白質反應構成複合鹽，是zui常用的蛋白質染料之一，但對SDS-蛋白質染色效果不好。另外，氨基黑10B染不同蛋白質時，著色度不等、色調不一(有藍、黑、棕等)；作同一凝膠柱的掃描時，誤差較大。

2．考馬斯亮藍R250(coomassie brilliant blue R250，簡稱CBBR250或PAGE blue83)

考馬斯亮藍R250的分子式為(wei) C14H44O7H3S2Na，MW=824，λmax=560-590nm。染色靈敏度比氨基黑高5倍。該染料是通過範德瓦爾鍵與(yu) 蛋白質結合，尤其適用於(yu) SDS電泳微量蛋白質染色，但蛋白質濃度超過一定範圍時，對高濃度蛋白質染色不合乎Beer定律，作定量分析時要注意這點。

3．考馬斯亮藍G250(簡稱CBBＧ250或PAGE blue G90，又名xylene brilliant cyanin G)

考馬斯亮藍G250比CBB R250多二個(ge) 甲基。MW=854，λmax=590-610nm。染色靈敏度不如R250，但比氨基黑高3倍。其優(you) 點是在三氯一酸中不溶而成膠體(ti) ，能選擇地使蛋白質染色而幾乎無本底色，所以常用於(yu) 重複性好和穩定的染色，適於(yu) 作定量分析。

4．銀染色法

此法是Switzer.R.C和Merril.CR首先提出的，它較CBB R250靈敏100倍。但染色機製

尚不清楚，可能與(yu) 攝影過程Ag+的還原相似。其靈敏度很高，牛血清為(wei) 4×10-5μg/mm2，即清蛋白為(wei) 8×10-5μg/mm2，cyt C為(wei) 1.7×10-4μg/mm2，因此也常用於(yu) 凝膠電泳蛋白質染色。

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