上海信帆：PCR實驗的靈敏度和特異性

上海信帆生物代做PCR實驗，包括實時熒光定量PCR，電泳PCR等，歡迎。

什麽(me) 是PCR實驗的靈敏度?
靈敏度指的是PCR擴增反應能夠檢測到目的基因的zui小值。研究結果表明，影 響PCR擴增效率的因素，如模板的複雜程度與(yu) 完整性、引物的純度及其與(yu) 模板的結合效率、反應溫度、DNA聚合酶的熱穩定性與(yu) 擴增性能、反應緩衝(chong) 液的離子組 成（主要指陽離子）、反應優(you) 化劑等等，都決(jue) 定了PCR實驗的檢測靈敏度。在*的擴增條件下，常規PCR反應能夠檢測到的pg(10-12g)數量級的目 的基因。對於(yu) 一個(ge) 特定的目的基因而言，模板與(yu) 引物通常都是已經限定好的因素。因此，選擇什麽(me) 樣的PCR反應體(ti) 係（包括DNA聚合酶與(yu) 反應緩衝(chong) 液等）就是研 究者提高PCR實驗靈敏度的關(guan) 鍵因素了。
與(yu) 實驗室自配的PCR擴增體(ti) 係相比，東(dong) 盛的Taq Mix對反應緩衝(chong) 液中的成分進行優(you) 化，並加入了適當比例的反應增強劑（PCR Enhancer），提高了DNA聚合酶的熱穩定性，顯著降低模板的二級結構對PCR擴增性能的影響，使得DNA聚合酶處於(yu) zui適活性狀態，從(cong) 而獲得了比自 配體(ti) 係更高的檢測靈敏度。即時反應體(ti) 係中隻有幾個(ge) 目的基因的拷貝，也能輕鬆檢測。
什麽(me) 是PCR實驗的特異性？
特異性指的是在PCR擴增過程中，專(zhuan) 一性地擴增目的片段而非其他片段的性 能。在PCR實驗本身的靈敏度很高，且實驗條件未充分優(you) 化的情況，通常會(hui) 在目的片段出現的同時伴隨有其他的雜帶，即發生非特異性擴增的現象。模板、引物性 質及質量、反應條件的控製等均會(hui) 影響PCR擴增的特異性。近年來的研究結果表明，緩衝(chong) 液的品質（如離子種類與(yu) 組成，反應優(you) 化劑等）對保證PCR的特異性擴 增起著不可忽視的作用。一般的緩衝(chong) 液中調節氫鍵作用的鹽隻有KCl，而東(dong) 盛HSTM TaqMix的緩衝(chong) 體(ti) 係通過反應優(you) 化劑以及KCl/(NH4)SO4鹽離子體(ti) 係的平衡調節，顯著提高了PCR擴增的特異性，降低背景。  
PCR實驗的靈敏度與(yu) 特異性是一對此長彼消的特性，這也決(jue) 定我們(men) 實驗體(ti) 係調節實際就是找到適合實驗的靈敏度與(yu) 特異性的平衡點。由於(yu) PCR體(ti) 係中的眾(zhong) 多成分，使得組合較多，篩選工作繁雜。東(dong) 盛基於(yu) 靈敏度與(yu) 特異性分別設計了PCR Mix和HS Taq Mix，幫您確定大的平衡點，如果您需要更細致的平衡點，請選擇相應的Mix Kit係列進行微調。