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關於elisa試劑盒實驗中的溫育和保溫,我們應該注意的事項

更新時間:2013-05-15      瀏覽次數:2326

    溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體(ti) 結合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩(liang) 次抗原抗體(ti) 反應一般在37℃經1~2小時,產(chan) 物的生成可達。為(wei) 加速反應,可提高反應的溫度,有些試驗在43℃進行,但不宜采用更高的溫度。抗原抗體(ti) 反應4℃更為(wei) *,在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜,以形成zui多的沉澱。但因所需時間太長,在ky体育在线登陆中一般不予采用。
  
  保溫的方式除有的ELISA儀(yi) 器附有特製的電熱塊外,一般均采用水浴,可將ky体育在线登陆板置於(yu) 水浴箱中,ELISA板底應貼著水麵,使溫度迅速平衡。為(wei) 避免蒸發,板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時可讓反應板漂浮在水麵上。若用保溫箱,ky体育在线登陆應放在濕盒內(nei) ,濕盒要選用傳(chuan) 熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui後將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴還是濕盒溫育,反應板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應,操作時的室溫應嚴(yan) 格限製在規定的範圍內(nei) ,標準室溫溫度是指20~25℃,但具體(ti) 操作時可根據說明書(shu) 的要求控製溫育。室溫溫育時,ky体育在线登陆隻要平置於(yu) 操作台上即可。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。為(wei) 保證這一點,一個(ge) 人操作時,一次不宜多於(yu) 兩(liang) 塊板同時測定。

 

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