PRODUCT CLASSIFICATION
產品分類阿利新藍-茜素紅胎鼠染色實驗檢測服務介紹
服務介紹:
阿利新藍-茜素紅染色(Alcian Blue-Alizarin Red Staining)是一種常用於(yu) 胚胎或胎鼠骨骼發育研究的組織化學染色方法。該技術可以同時染色軟骨和骨組織,使軟骨呈現藍色,骨組織呈現紅色,從(cong) 而清晰地區分兩(liang) 者,便於(yu) 觀察骨骼發育的形態和過程。
染色原理:
1、阿利新藍(Alcian Blue):
阿利新藍是一種陽離子染料,能夠與(yu) 酸性多糖(如軟骨中的硫酸軟骨素和透明質酸)結合,使軟骨組織呈現藍色。
2、茜素紅(Alizarin Red):
茜素紅是一種陰離子染料,能夠與(yu) 鈣離子結合,使鈣化的骨組織呈現紅色。
實驗步驟
1. 樣本準備
取胎鼠(通常為(wei) 胚胎期或新生鼠),去除皮膚和內(nei) 髒,保留骨骼。用固定液(如95%乙醇或4%多聚甲醛)固定樣本,通常固定24-48小時。
2. 染色
阿利新藍染色:將樣本放入阿利新藍染液中(通常為(wei) 0.1%阿利新藍溶於(yu) 酸性乙醇或醋酸緩衝(chong) 液),染色6-24小時。染色後,用酸性乙醇(如1%鹽酸乙醇)脫色,直至軟骨呈現清晰的藍色。
茜素紅染色:將樣本放入茜素紅染液中(通常為(wei) 0.1%茜素紅溶於(yu) 蒸餾水或堿性溶液),染色2-4小時。染色後,用蒸餾水洗滌樣本,去除多餘(yu) 染料。
3. 透明化處理
將樣本依次放入梯度乙醇(如70%、95%、100%)中脫水。
使用透明劑(如甘油、苯甲醇或苯甲酸苄酯)透明化樣本,使骨骼結構更清晰可見。
4. 觀察與(yu) 保存
將樣本置於(yu) 透明溶液中(如甘油或苯甲醇),在顯微鏡下觀察。可拍照記錄染色結果,樣本可長期保存於(yu) 透明溶液中。
注意事項:
1、染色時間:染色時間需根據樣本大小和發育階段調整,避免染色過深或過淺。
2、脫色處理:阿利新藍染色後需充分脫色,以免影響茜素紅染色效果。
3、透明化:透明化處理需逐步進行,避免樣本變形或損壞。
4、樣本選擇:胎鼠的發育階段需根據實驗目的選擇,通常選擇骨骼發育關(guan) 鍵期