微生物鑒定中常用的生化反應

微生物鑒定中常用的生化反應

實驗原理：

1. 有些細菌具有合成澱粉酶的能力，可以分泌胞外澱粉酶。澱粉酶可以使澱粉水解為(wei) 麥芽糖和葡萄糖，澱粉水解後遇碘不再變藍色。

2. 細菌產(chan) 生的脂肪酶能分解培養(yang) 基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸可以使培養(yang) 基pH下降，可通過在油脂培養(yang) 基中加入中性紅做指示劑進行測試。中性紅指示範圍為(wei) pH6.8（紅）——8.0（黃）。當細菌分解脂肪產(chan) 生脂肪酸時，則菌落周圍培養(yang) 基中出現紅色斑點。

3. 某些細菌分泌蛋白酶分解明膠，產(chan) 生小分子物質。如果細菌具有分解明膠的能力，則培養(yang) 基可由原來固體(ti) 狀態變成液體(ti) 狀態。

4. 牛乳中主要含有乳糖、酪蛋白等成分。細菌對牛乳的利用主要是指對乳糖及酪蛋白的分解和利用。牛乳中常加入石蕊作為(wei) 酸堿指示劑和氧化還原指示劑。石蕊中性時呈淡紫色，酸性時呈紅色，堿性時呈藍色，還原時則部分或全部脫色。細菌對牛乳的利用可分三種情況：（1）酸凝固作用：細菌發酵乳糖後，產(chan) 生許多酸，使石蕊牛乳變紅，當酸度很高時，可使牛乳凝固，此稱為(wei) 酸凝固。（2）凝乳酶凝固作用：某些細菌能分泌凝乳酶，使牛乳中的酪蛋白凝固，這種凝固在中性環境中發生。通常這種細菌還具有水解蛋白質的能力，因而產(chan) 生氨等堿性物質，使石蕊變藍。（3）腖化作用：酪蛋白被水解，使牛乳變成清亮透明的液體(ti) 。腖化作用可以在酸性條件下或堿性條件下進行，一般石蕊色素被還原褪色。

小妙招：

1.如何解釋澱粉酶為(wei) 胞外酶而非胞內(nei) 酶：澱粉為(wei) 大分子物質，進入細胞很困難，甚至需要高耗能的胞吞作用，因而通過胞外酶的作用，將澱粉水解為(wei) 較小分子葡萄糖後再運入細胞內(nei) ，不需要高耗能的胞吞作用。

2. 碘液的作用：由於(yu) 澱粉經過水解會(hui) 生成葡萄糖，葡萄糖為(wei) 多羥基醛，因此可以利用醛這個(ge) 基團的特征性質進行驗證，比如銀鏡反應，斐林試劑等，呈陽性說明澱粉水解產(chan) 生葡萄糖。陰性則說明澱粉沒有被水解。

注意事項：

1. 在澱粉水解實驗中，觀察各種細菌的生長情況，加入碘液時要輕輕旋轉，使得碘液均勻鋪滿整個(ge) 平板。

2. 每個(ge) 實驗需要設置陰性和陽性對照組，以保證實驗結果。

3. 細胞生長較快，需要及時觀察和記錄。

4. 接種前要用記號筆做好標記，接種時要