人視黃醇結合蛋白試劑盒的洗板方法

人視黃醇結合蛋白試劑盒的洗板方法

產(chan) 品名稱：人視黃醇結合蛋白試劑盒  

產(chan) 品規格：48T/96T                      

儲(chu) 存條件：2-8℃

有效期：6個(ge) 月

檢測原理試劑盒采用雙抗體(ti) 夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人視黃醇結合蛋白（RBP）捕獲抗體(ti) 的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體(ti) ，經過溫育並洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人視黃醇結合蛋白（RBP）呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

1.  血清：使用不含熱原和內(nei) 毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液後，3000轉離心10分鍾將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鍾取上清。

3.  細胞上清液：3000轉離心10分鍾去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鍾取上清。

5.  保存：如果樣本收集後不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存於(yu) -20℃，避免反複凍融，在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍。

洗板方法

1.  手工洗板：甩盡孔內(nei) 液體(ti) ，每孔加滿洗滌液，靜置1min後甩盡孔內(nei) 液體(ti) ，在吸水紙上拍幹，如此洗板5次。

2.  自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。 

試劑盒組成

注：標準品濃度依次為(wei) ：80、40、20、10、5、0 μg/mL.

操作注意事項

1.  試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡60分鍾。從(cong) 冰箱取出的濃縮洗滌液會(hui) 有結晶，這屬於(yu) 正常現象，水浴加熱使結晶溶解後再使用。樣本在使用前也要在室溫平衡60分鍾。

2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫幹燥）保存。

3.  預處理後的樣本無需稀釋，直接取10μL加樣即可。

4.  嚴(yan) 格按照說明書(shu) 中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.  所有液體(ti) 組分使用前充分搖勻。

人視黃醇結合蛋白試劑盒的洗板方法