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瘧原蟲染色液(吖澱橙染色液)的注意事項

更新時間:2023-11-30      瀏覽次數:577

瘧原蟲染色液(吖澱橙染色液)的注意事項

產(chan) 品簡介:

抱子蟲無明顯運動細胞器,全部發育階段均營寄生生活。生活史較複雜,有無性的裂體(ti) 增殖、抱子增殖和有性的配子生殖兩(liang) 種生殖方式,並可以在同一個(ge) 宿主或分別在兩(liang) 個(ge) 不同宿主體(ti) 內(nei) 完成。寄生於(yu) 人體(ti) 的抱子蟲主要有瘧原蟲、剛地弓形蟲、卡氏肺跑子蟲、隱抱子蟲等.瘧原蟲是營寄生生活的抱子蟲,主要寄生於(yu) 人及多種哺乳動物,少數寄生於(yu) 鳥類和爬行類動物,目前已知有 130 餘(yu) 種。寄生於(yu) 人體(ti) 的瘧原蟲主要有間日瘧原蟲、惡性瘧原蟲、三日瘧原蟲和卵形瘧原蟲等。瘧原蟲的基本結構包括胞核、胞質和胞膜,用瑞氏或吉姆薩染色後,胞核呈紫紅色,胞質為(wei) 藍色。瘧原蟲在人體(ti) 內(nei) 先後在肝細胞和紅細胞內(nei) 發育,而目其致病是在紅細胞內(nei) 期裂體(ti) 增殖時發生的。瘧原蟲在紅細胞內(nei) 發育包括小滋養(yang) 體(ti) 、大滋養(yang) 體(ti) 、裂殖體(ti) 和配子體(ti) 四個(ge) 階段,可通過瑞氏或吉姆薩染色觀察其不同時期的不同形態。

瘧原蟲的病原學檢查主要分為(wei) 厚、薄血膜染色鏡檢法和血沉棕黃層定量分析法(QBC)。厚血膜中原蟲比較集中,易檢獲,但製片中紅細胞容易溶解,原蟲形態有所改變,蟲種鑒別比較困難;薄血膜中紅細胞不易被破壞,瘧原蟲形態結構較完整、典型,容易識別和鑒別蟲種,但原蟲密度低時容易漏檢,故常采用一張玻片同時製作厚、薄兩(liang) 種血膜,用瑞氏、吉姆薩或吖院橙染色查找瘧原蟲的存在。QBC分析法的原理是由於(yu) 感染瘧原蟲的紅細胞比正常紅細胞輕,而比白細胞略重,離心分層後,集中分布於(yu) 正常紅細胞層的上部,白細胞層的下部,加入吖院橙試劑後,用熒光顯微鏡觀察結果,敏感度比普通鏡檢法高很多,更簡便、快捷,但費用較高。

瘧原蟲染色液(吖呢橙染色液)由吖橙和磷酸鹽等組成,主要是采用熒光染料吖院橙進行厚薄血膜的染色,通過滲透、吸附和化合等作用與(yu) 寄生蟲或組織細胞的不同成分結合成為(wei) 帶熒光的標本,再經過熒光光源的激發,使結合的熒光素的標本發出熒光,通過熒光顯微鏡在暗室中觀察瘧原蟲的存在,本法簡單、快捷,檢出率高於(yu) 常規法。該試劑僅(jin) 用於(yu) 科研領域不適用於(yu) 臨(lin) 床診斷或其他用途。

產(chan) 品組成:

自備材料:

1、蠟筆、甲醇、去離子水

2、載玻片、熒光顯微鏡、暗室

3、抗熒光淬滅封片劑

操作步驟(僅(jin) 供參考):

1、製作血膜: 厚血膜比吉姆薩染色的厚血膜略薄,可用 3l 血塗成直徑為(wei) 1.2~1.5m 的亞(ya) 厚血膜;薄血膜則不宜過薄,可在塗片時推片以 45°角塗成較厚的薄血膜

2、配製吖橙染色液:0.1ml 吖橙存液加入 9.9ml磷酸鹽緩衝(chong) 液混合即成,可於(yu) 4C保存10~15 天。

3、染色前,先用蠟筆在厚薄血膜間劃一條橫線

4、用 0.5~1ml 甲醇固定薄血膜,清水溶去厚血膜上的血紅蛋白

5、吸取吖橙染色液滴加到血膜上,室溫避光染色 30s~120s,加蓋玻片6、熒光顯微鏡(激發濾光片波長 488nm ,阻斷濾光片波長 515nm) 暗室中觀察數並拍照不能及時觀察的可用抗熒光滅封片劑封片,可延緩熒光的淬滅

染色結果

瘧原蟲和白細胞的核呈現黃綠色熒光,胞漿呈橘紅色熒光

注意事項

1、塗製血膜用的載玻片使用前需經鉻酸洗液處理2、染色用的血膜厚薄應符合要求.

3、吖橙染色液一般建議臨(lin) 用前稀釋,不宜存放過久4、滴加染色液應以覆蓋血膜為(wei) 準

5、為(wei) 了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作

有效期 :12 個(ge) 月有效。常溫運輸,4保存。

瘧原蟲染色液(吖澱橙染色液)的注意事項


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