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ELISA標準曲線分析步驟
1. 標曲和樣本孔的每個孔450nm的OD值減去630nm(或570nm)的OD值;
2. 再將獲得的標曲和樣本孔數據分別減去空白孔Blank的OD值;
3. 以標曲的濃度為橫坐標,以上算出的OD值為縱坐標,擬合標曲(選擇R2值大於0.99的比較好的擬合方式,必要時可以刪除個別差異較大的標曲點進行擬合)
4. 計算樣本值,將樣本減去空白孔的OD值複製,選軟件中的“粘貼",得到的X值再乘以相應的稀釋倍數就是最終的濃度值。
1.很多 Kit 可以同時用多種方式進行擬合;
2.除了試劑盒推薦的擬合方式,其他的擬合方式也可以嚐試;
3.雙抗夾心法可以選擇直線,二次,四參數三種;可以直接擬合,也可以采用扣除 O 孔本底後取對數的方式;
4.取單數可以采用單對數,或者雙對數法都可以;單對數就是 X 值(濃度值取對數);
5.Logit-log的擬合方法是用於(yu) 競爭(zheng) 法的;競爭(zheng) 法也可以用四參數或者五參數的方式進行擬合。
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