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ELISA的基本原理:
①使抗原或抗體(ti) 結合固相載體(ti) 表麵,並保持活性。
②使抗體(ti) 或抗原與(yu) 某種酶連接成酶標抗體(ti) 或抗原。
③在測定時,把受檢抗體(ti) (或抗原)和酶標抗原(或抗體(ti) )按不同的步驟與(yu) 固相載體(ti) 表麵的抗原(或抗體(ti) )起反應。
④用洗滌的方法去除未結合的酶標抗原(或抗體(ti) ),zui後結合在固相載體(ti) 上的酶量與(yu) 標本中受檢物質的量成一定的比例。
⑤加入酶反應的底物後,底物被酶催化變為(wei) 有色產(chan) 物。
⑥產(chan) 物的量與(yu) 標本中受檢物質的量直接相關(guan) ,故可根據顏色反應的深淺來定性或定量分析。
ELISA方法的基本原理是:①使抗原或抗體(ti) 結合到某種固相載體(ti) 表麵,並保持其免疫活性。②使抗原或抗體(ti) 與(yu) 某種酶連接成酶標抗原或抗體(ti) ,這種酶標抗原或抗體(ti) 既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體(ti) 或抗原)和酶標抗原或抗體(ti) 按不同的步驟與(yu) 固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 起反應。用洗滌的方法使固相載體(ti) 上形成的抗原抗體(ti) 複合物與(yu) 其他物質分開,zui後結合在固相載體(ti) 上的酶量與(yu) 標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物後,底物被酶催化變為(wei) 有色產(chan) 物,產(chan) 物的量與(yu) 標本中受檢物質的量直接相關(guan) ,故可根據顏色反應的深淺刊物定性或定量分析。由於(yu) 酶的催化頻率很高,故可極大地地放大反應效果,從(cong) 而使測定方法達到很高的敏感度。因此,ELISA檢測是一項定位、定性和定量(敏感度可達每毫升ng~pg水平)的綜合技術。常用的酶是辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(AKP)
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