PRODUCT CLASSIFICATION
產品分類新品上市:明膠酶譜實驗配套用的配膠試劑盒
很多老師在使用我們(men) 的明膠酶譜試劑盒時候,還需要自己準備配置大膠小膠用的試劑,上海信帆特別推出配套用的配膠試劑盒,一步解決(jue) 實驗中遇到的各種問題,下麵我們(men) 一起來了解一下吧、
描述:本產(chan) 品提供了配製SDS-PAGE凝膠所需的各種試劑,用戶隻需自備製膠器具和蒸餾水,即可配製高質量的各種濃度的變性PAGE膠,方便,快捷。本試劑盒至少可以配製30塊常規大小的PAGE膠,並且其中的分離膠緩衝(chong) 液和濃縮膠緩衝(chong) 液中已加入10%SDS,使用時無需另外加入。
組成:
產(chan) 品名稱 | 包裝 | 保存條件 |
30%Acr-Bis(29:1) | 100ml | 2-8℃ 避光 |
分離膠緩衝(chong) 液 | 80ml | 室溫 |
濃縮膠緩衝(chong) 液 | 25ml | 室溫 |
APS(過硫酸銨) | 0.5g | 室溫 |
TEMED | 1ml | 室溫、避光 |
*試劑盒中提供的APS(過硫酸銨)為(wei) 固體(ti) 粉末,使用前加入雙蒸水溶解即配製成10%APS(0.5g APS加入5ml雙蒸水),將溶液分裝後置於(yu) -20℃保存,通常半年內(nei) 有效。
操作步驟:根據目的蛋白分子量大小選擇合適的凝膠濃度,不同濃度的SDS-PAGE分離膠的最佳分離範圍參考附表1。
1.灌製分離膠
(1)參照凝膠模具說明書(shu) ,裝配好凝膠模具。
(2)將不同體(ti) 積的30%Acr-Bis(29:1)、分離膠緩衝(chong) 液和雙蒸水在小燒杯中混合。
(3)加入10%APS和TEMED,輕輕攪拌混勻,避免產(chan) 生氣泡。
(4)將分離膠溶液灌入凝膠玻璃槽中,然後在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-3cm的水層,用於(yu) 壓平液麵。
(5)靜置30-60min,至分離膠凝固。
2.灌製濃縮膠
(1)去除覆蓋在分離膠上的水層,並用濾紙吸幹,水份吸不幹,可能會(hui) 導致濃縮膠和分離膠分開。
(2)將不同體(ti) 積的30%Acr-Bis(29:1)、分離膠緩衝(chong) 液和雙蒸水在小燒杯中混合。
(3)加入10%APS和TEMED,輕輕攪拌混勻,避免產(chan) 生氣泡。
(4)將濃縮膠溶液加至分離膠的上麵,插入樣品梳,避免產(chan) 生氣泡,靜置20-30min,直至濃縮膠聚合。
(5)待凝膠聚合後,小心拔下梳子,以免破壞加樣孔。
(6)進行常規電泳。
注意事項:
1.10%APS配置好後,應當-20℃保存,並且應盡量減少室溫存放時間,以防失效。
2.TEMED易揮發,使用後請擰緊瓶蓋。
3.凝膠凝聚的速度與(yu) 溫度等關(guan) 係密切,可通過調節APS和TEMED的用量,控製凝膠的聚合速度,凝膠聚合過快不利於(yu) 操作。
4.丙烯酰胺,TEMED等有毒,操作時請穿實驗服並戴手套。
5.在凝膠配製過程中,應盡量避免產(chan) 生氣泡。
6.在分離膠上層加蒸餾水時要小心操作,加水時速度不宜過快。
新品上市:明膠酶譜實驗配套用的配膠試劑盒