噻唑蘭MTT的正確配置方法

噻唑蘭(lan) MTT的正確配置方法

上海信帆生物供應噻唑蘭(lan) MTT，產(chan) 品質量穩定，價(jia) 格低廉！

稱取25mg MTT粉末溶解在5mg/ml的工作液，4℃保存。一周內(nei) 使用。

產(chan) 品參數

其它名稱：噻唑蘭(lan) ；噻唑藍溴化四唑；3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide

298-93-1

分子式：C18H16BrN5S          

分子量：  黃色至橙色粉末

純度：  >98%

溶解性：溶於(yu) 水(20 mg/ml)，緩衝(chong) 鹽溶液(5 mg/ml)

結構式：

噻唑蘭(lan) （MTT是一種可接受氫離子的化合物染料，帶正電荷，具有細胞膜滲透性。活細胞線粒體(ti) 中的琥珀酸脫氫酶能夠將外源進入的MTT-甲臢結晶，而死細胞不具有此功能。甲臢結晶是不能穿透細胞膜，因此沉積在處於(yu) 增殖且未受損傷(shang) 的細胞內(nei) 。甲臢結晶可用570 nm的吸光度反映甲臢的生成量。而甲臢的生成量與(yu) 活細胞數目成正比，用以評估細胞存活狀況。

使用方法：

1：接種細胞：用含10％胎牛血清的培養(yang) 基配製單個(ge) 細胞懸液，以每孔1000-10000個(ge) 細胞量接種到96孔板，每孔體(ti) 積200ul。

2: 培養(yang) 細胞：正常培養(yang) 及加藥等處理細胞。

3：呈色：培養(yang) 及處理完畢後，PBS清洗每孔細胞後，每孔加MTT溶液20ul（5mg/ml用PBS配製，pH=7.4)，繼續培養(yang) 箱孵育4 h。

4： 終止培養(yang) ：小心吸棄孔內(nei) 培養(yang) 上清液，對於(yu) 懸浮細胞需要離心後再吸棄孔內(nei) 培養(yang) 上清液。每孔加150ul DMSO，振蕩10min，使結晶物充分融解。

5：比色：490nm酶聯免疫監測儀(yi) 上測定各孔光吸收值，記錄結果，以時間為(wei) 橫坐標，吸光值為(wei) 縱坐標繪製細胞生長曲線。

噻唑蘭(lan) MTT的正確配置方法