糞便基因組DNA快速提取試劑盒這麽使用更精確

糞便基因組DNA快速提取試劑盒這麽(me) 使用更精確

上海信帆生物供應糞便基因組DNA快速提取試劑盒，產(chan) 品質量穩定，現貨供應！

儲(chu) 存條件：常溫保存，保質期1 年。
產(chan) 品內(nei) 容：
產(chan) 品內(nei) 容DE281-50T
裂解液I 25 mL
純化液II 25 mL
結合液III 40 mL
洗滌液50 mL
洗脫液（TE） 10 mL
矽膠膜DNA 吸附柱50 套
說明書(shu) 1 份
產(chan) 品介紹:
糞便基因組DNA 快速提取試劑盒適用於(yu) 從(cong) 各種動物糞便中快速提取基因組DNA。
提取的DNA OD260/280 一般在1.8 以上，純度高，不含汙染和抑製劑，可以直接或者稀釋後用作PCR
擴增的模板。
可以同時提取到腸道上皮細胞和可能的腸道病原菌的DNA。
注意事項：
1. 裂解液I 容易產(chan) 生沉澱，，用前需要放置在65℃預熱使沉澱溶解，用前充分搖勻。
2. 自備試劑：氯仿。
（一）樣品裂解：
1. . 稱取0.1-0.3 g 的糞便，加入到含0.5mL 預熱裂解液I 的1.5mL 的離心管中，震蕩器上劇烈震蕩5-10
分鍾。如果是擴量操作，可以使用更多糞便和較大離心管。也可以將同一種糞便在較大離心管中震蕩處
理，然後再分到1.5 mL 離心管中。注意:不論使用大的還是小的離心管，一定要讓管底的糞便震蕩起來。
2. 將離心管置於(yu) 65℃水浴中保溫至少10 分鍾。
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3. 12000-15000 g 室溫離心3 分鍾，將上清轉移到一新離心管中(上清液一般呈淡黃色或深棕色，實際
顏色隨樣品而異，上清液的體(ti) 積一般為(wei) 300-400 μL)。
（二）樣品純化：
1. 在上清液中加入等體(ti) 積的裂解液II，上下顛倒30 秒充分混勻，溶液將呈白色或淡黃色混濁狀。
2. 將離心管冰浴至少5 分鍾。
3. 12000-15000 g 室溫離心3 分鍾，轉移上清到新的1.5 mL 離心管中，體(ti) 積在0.7 mL 左右。
4. 加入0.2 mL 的氯仿(自備)，震蕩器上充分振蕩30 秒混勻。注意:一定要讓管底的溶液震蕩起來。
5. 12000-15000 g 室溫離心3 分鍾，小心轉移上清到新離心管中。
說明：離心後兩(liang) 相交界麵將有白色膜狀物，其中有機相部分顏色較深，一般呈淡棕色。將0.5 mL 上清轉
移到新的1.5 mL 離心管中。如果有多餘(yu) 的可以棄之不用。
（三）基因組DNA 收集：
1. 在步驟（二）所得的上清中加入0.8mL 的結合液III，顛倒數次混勻後，分多次上同一DNA 吸附柱，每
次上柱後均先室溫放置2 min，然後12,000 rpm 離心1 min，倒掉穿透液。
2. 在吸附柱中加入500 μL 洗滌液，12,000 rpm 離心1 min，棄穿透液。
3. 再將吸附柱12,000 rpm 離心30 s 以甩幹乙醇。
4. 將吸附柱放入一個(ge) 幹淨的1.5 mL 離心管中。在吸附柱中央加入50 μL 洗脫液（65-70℃預熱），室溫
靜置5 min。12,000 rpm 離心2 min。將穿透液重新加入吸附柱中央，12,000 rpm 離心1 min 以洗脫更多
基因組DNA。
5. 檢測DNA 質量。將所得的基因組DNA 保存於(yu) -20ºC 冰箱。

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