改良苯酚品紅染色實驗操作步驟！

改良苯酚品紅染色實驗操作步驟！

實驗步驟：

1、取材：查閱相關(guan) 植物對應的根尖分裂旺盛期，在此期間剪取新生根尖約2-3cm，純水稍洗淨。

2、預處理：用秋水仙素或者8-羥基喹啉預處理或者置於(yu) 純水中4℃處理約24h(選做)。

3、固定：取出根尖置於(yu) 卡諾氏固定液(無水乙醇：冰醋酸=3:1混勻)中4℃固定約1-4h，轉移根尖至75%的乙醇中保存;

4、低滲：取出根尖純水稍洗2遍，置於(yu) 純水中浸泡約30min;

5、解離：取出根尖置於(yu) 1M HCL溶液中60℃處理10-30min，純水洗2遍，置於(yu) 純水中浸泡約30min;

6、取材染色：將根尖用純水清洗2遍後置於(yu) 載玻片上，切取根尖分生區並撥散，組畫筆畫圈，晾幹或者稍烤幹分生區組織細胞，滴加改良苯酚品紅染液染色15-35min;

7、壓片：直接用染色液封片，稍吸除多餘(yu) 的染色液，蓋玻片上覆蓋濾紙，用橡皮擦或者手指平整地按壓玻片進行壓片，分散染色體(ti) ;

8、封片：將製好的玻片放置-20℃下冰凍約10min，取出後用刀片從(cong) 蓋玻片一角迅速撬開，晾幹或烤幹載玻片和蓋玻片，甘油明膠或中性樹膠封片。

9、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。

染色結果：

染色體(ti) 呈深的紫紅色，背景淺的紫紅色或者無色。

注意事項：

1、若固定後的根尖暫時不使用，保存在75%的乙醇中，下次使用前需要再次固定，4℃條件下約4h。

2、壓片過程中，防止蓋玻片移動或者破裂，得到數量清晰的染色體(ti) ，此步驟操作較難成功。

3、陰涼通風處可保存1年不變質。