人端粒酶（TE）檢測原理！

人端粒酶（TE）檢測原理！

端粒酶（Telomerase），在細胞中負責端粒的延長的一種酶，是基本的核蛋白逆轉錄酶，可將端粒DNA加至真核細胞染色體(ti) 末端，把DNA複製損失的端粒填補起來，使端粒修複延長，可以讓端粒不會(hui) 因細胞分裂而有所損耗，使得細胞分裂的次數增加。

產(chan) 品名稱：人端粒酶（TE）ELISA檢測試劑盒

產(chan) 品規格：96T

儲(chu) 存條件：2-8℃，避光防潮保存

有效期：6個(ge) 月

檢測原理：

試劑盒采用雙抗體(ti) 夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人端粒酶（TE）捕獲抗體(ti) 的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體(ti) ，經過溫育並*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人端粒酶（TE）呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

實驗步驟（僅(jin) 供參考）

1.  從(cong) 室溫平衡60min後的鋁箔袋中取出所需板條，剩餘(yu) 板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；

4.  隨後標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體(ti) 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體(ti) ，吸水紙上拍幹，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍幹，如此重複洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nei) ，在450nm波長處測定各孔的OD值。

試劑盒性能：

1.準確性：標準品線性回歸與(yu) 預期濃度相關(guan) 係數R值，大於(yu) 等於(yu) 0.9900。

2. 靈敏度：zui低檢測濃度小於(yu) 0.1 ng/ml。

3. 特異性：不與(yu) 其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重複性：板內(nei) 變異係數小於(yu) 10%、板間變異係數小於(yu) 15%。