人血栓前體蛋白（TpP）ELISA檢測試劑盒操作說明！

人血栓前體(ti) 蛋白（TpP）ELISA檢測試劑盒操作說明！

產(chan) 品名稱：人血栓前體(ti) 蛋白（TpP）ELISA檢測試劑盒

規格：96T

儲(chu) 存：2-8℃，避光防潮保存。

有效期：6個(ge) 月

試劑盒采用雙抗體(ti) 夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人血栓前體(ti) 蛋白（TpP）捕獲抗體(ti) 的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體(ti) ，經過溫育並*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人血栓前體(ti) 蛋白（TpP）呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

操作步驟：

1.  從(cong) 室溫平衡20min後的鋁箔袋中取出所需板條，剩餘(yu) 板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；

4.  隨後標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體(ti) 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體(ti) ，吸水紙上拍幹，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍幹，如此重複洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nei) ，在450nm波長處測定各孔的OD值。

注意事項：

1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鍾。從(cong) 冰箱取出的濃縮洗滌液會(hui) 有結晶，這屬於(yu) 正常現象，水浴加熱使結晶*溶解後再使用。

2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫幹燥）保存。

3.  預處理後的樣本無需稀釋，直接取10μL加樣即可。

4.  嚴(yan) 格按照說明書(shu) 中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.  所有液體(ti) 組分使用前充分搖勻。