鼠尾膠原蛋白 I型，可以用於細胞培養的膠原蛋白

鼠尾膠原蛋白 I型，可以用於(yu) 細胞培養(yang) 的膠原蛋白

上海信帆生物供應鼠尾膠原蛋白 I型，可以用於(yu) 細胞培養(yang) 的膠原蛋白，產(chan) 品現貨供應，質量穩定，深受廣大科研用戶青睞！

 鼠尾膠原蛋白 I型(rat tail tendon collagen type I)說明書(shu)

產(chan) 品說明

鼠尾膠原蛋白 I型(rat tail tendon collagen type I),5mg/ml, 溶解於(yu)  0.006mol/L 乙酸, 無菌。

4度保存，切勿凍存，有效期一年。

本公司生物試劑的鼠尾膠原蛋白 I型(rat tail tendon collagen type I)是通過 Birkedal-Hansen¹ 的方法，通過醋酸抽提、氯化鈉沉澱、磷酸氫二鈉沉澱等步驟製備的。

鼠尾膠原蛋白可用於(yu) 包被細胞培養(yang) 器皿，培養(yang) 一些在普通細胞培養(yang) 器皿中不易貼壁的細胞。也可用於(yu) 製備三維膠，模擬真實的生長環境，使細胞在三維環境中生長。

使用方法

1、細胞培養(yang) 器皿的表麵包被 推薦濃度： 1-5ug/cm²

以包被濃度為(wei) 2 ug/cm2 為(wei) 例：

用無菌0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/ml。按表 (一)體(ti) 積加到相應的培養(yang) 器皿中：

確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表麵，開蓋在超淨台上過夜晾幹。 也可以在室溫放置 1小時後，用PBS洗3-4次後直接使用。

包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3個(ge) 月以上的時間。

2、三維膠原的製備

鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上，pH 7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解於(yu) 0.006mol/L 乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06X 體(ti) 積的 0.1mol/L NaOH 來中和。

需要的溶液 ( 均需要 無菌 、 預冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚紅用於(yu) pH 指示 )或 10x 培養(yang) 液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 雙蒸水

A．不含細胞的三維膠原的製備（以配製1毫升，1mg/ml三維膠為(wei) 例）：將200ul 鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置於(yu) 冰浴的離心管中，加入 690ul H2O。然後加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中，會(hui) 由於(yu) NaOH不能迅速混勻而產(chan) 生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入100ul 10xPBS或10x培養(yang) 液，混勻後立即加到培養(yang) 器皿中(混勻後pH為(wei) 7左右，如果PBS或培養(yang) 液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。將培養(yang) 器皿在室溫(25度左右)下放置20分鍾待膠凝固後，轉移到培養(yang) 箱內(nei) 。如果配製中使用的是10xPBS，使用前需要加入適當體(ti) 積的細胞培養(yang) 液預平衡。

B．含細胞的三維膠原的製備（以配製1毫升，1mg/ml三維膠為(wei) 例）：準備好懸浮於(yu) 培養(yang) 液的細胞，並放置於(yu) 冰浴中。將200ul 鼠尾膠原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中，會(hui) 由於(yu) NaOH不能迅速混勻而產(chan) 生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入23ul 10xPBS或10x培養(yang) 液，混勻(混勻後pH為(wei) 7左右，如果PBS或培養(yang) 液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液，混勻後立即加到培養(yang) 器皿中。將培養(yang) 器皿在室溫下放置20分鍾待膠凝固後，加入適當體(ti) 積的細胞培養(yang) 液，轉移到培養(yang) 箱中培養(yang) 。

注：鼠尾膠原蛋白I型在室溫下pH中性時可迅速成膠，在操作過程中要盡量保持低溫。

本產(chan) 品僅(jin) 限於(yu) 實驗室研究用。

鼠尾膠原蛋白 I型，可以用於(yu) 細胞培養(yang) 的膠原蛋白