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脫氧雪腐鐮刀菌烯醇酶免檢測試劑盒真的特別好用

更新時間:2020-07-16      瀏覽次數:1373

脫氧雪腐鐮刀菌烯醇酶免檢測試劑盒真的特別好用

上海信帆生物供應脫氧雪腐鐮刀菌烯醇酶免檢測試劑盒,該產(chan) 品是我司明星產(chan) 品,深受廣大科研用戶青睞,質量穩定,大家可隨時谘詢!

脫氧雪腐鐮刀菌烯醇酶免檢測試劑盒,試劑盒采用固相酶聯免疫間接競爭(zheng) 法測定脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON,又稱嘔吐毒素),適用於(yu) 玉米、大麥、小麥等穀物及其製品,飼料及其原料中玉米赤黴烯酮的快速篩查,分析時間小於(yu) 1小時。

【適用範圍】 本試劑盒可定性、定量檢測小麥、麵粉等穀物及其加工製 品和飼料中的嘔吐毒素

【樣本前處理步驟】

一、麵粉、小麥等穀物及其加工製品(稀釋倍數:10) 1. 取 5.0g 粉碎好的樣品,加入 25mL 去離子水,混勻; 2. 充分振蕩 15min 後過濾或 4000rpm 離心 5-10min; 3. 取 500μL 濾液或上清液加 500μL 樣品稀釋液(試劑盒中 提供),充分混勻後即為(wei) 待測樣液; 4. 移取該液 50uL 進行檢測。

二、麩皮、豆粕等(稀釋倍數:10) 1. 取 5.0g 粉碎好的樣品,加入 25mL 去離子水,混勻; 2. 充分振蕩 15min 後過濾或 4000rpm 離心 5-10min; 3. 取 500μL 濾液或上清液加 500μL 去離子水,充分混勻後 即為(wei) 待測樣液; 4. 移取該液 50uL 進行檢測。

 

三、玉米粉、雞料、鴨料、豬料等(稀釋倍數:10) 1. 取 5.0g 粉碎好的樣品,加入 25mL 去離子水,混勻; 2. 充分振蕩 15min 後過濾或 4000rpm 離心 5-10min; 3. 取 500μL 濾液或上清液加 500μL 20%甲醇-水,充分混勻 後即為(wei) 待測樣液; 4. 稀釋後的待測樣液需 pH 值約 7.0 左右,移取該液 50uL 進 行檢測。

注意事項:

1. 試劑及樣本沒有恢複到室溫(20~25℃)會(hui) 導致所有標準 的 OD 值偏低。

2. 在洗板過程中如果出現板孔幹燥的情況,則會(hui) 出現標準 曲線不成線性,重複性不好的現象。所以洗板拍幹後應 立即進行下一步操作。

3. 每種試劑使用前均需搖勻。

4. 反應終止液為(wei) 2M 硫酸,避免接觸皮膚。

5. 不要使用過了有效期的試劑盒;也不要摻雜使用過了有 效期的試劑盒;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

6. 儲(chu) 存條件:試劑盒保存於(yu) 2~8℃,不能冷凍,將不用的 微孔板重新真空密封。標準物質和無色的顯色劑對光敏 感,因此要避光保存。 7. 試劑變質的跡象:顯色試劑有任何顏色表明顯色劑變質, 應當棄之。0 標準的吸光度(450/630nm)值小於(yu) 0.5 (A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質。

8. 對玻璃器皿和DON溶液消毒用次氯酸鈉(10%,v/v) 溶液浸泡過夜。

9. 該試劑盒采用室溫反應(20~25℃),當反應溫度高於(yu) 25℃或者低於(yu) 20℃時,均需相應縮短或延長反應時間, 具體(ti) 可谘詢

【概要】

嘔吐毒素(Vomitoxin),化學上稱作脫氧腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),屬於(yu) 黴菌的單端孢菌素族,具有很高的細胞毒性及免疫抑製性質,是由幾種粉色鐮刀黴真菌屬產(chan) 生的。玉米中容易產(chan) 生這種毒素。嘔吐毒素在小麥、玉米以及稻米中的含量通常是mg/kg級。DON屬於(yu) 劇毒或中等毒物,人畜攝入了被DON汙染的食物/飼料後,會(hui) 導致厭食、嘔吐、腹瀉、發燒、站立不穩、反應遲鈍等急性中毒症狀,嚴(yan) 重時損害造血係統造成死亡。研究表明,DON可能對免疫係統有影響,有明顯胚胎毒性和一定致畸作用,可能有遺傳(chuan) 毒性,但無致癌、致突變作用。穀物及飼料中DON的含量有嚴(yan) 格的*。我國穀物中DON 的*為(wei) 1.0 mg/kg 。HPLC或GC-MS用作檢測嘔吐毒素的方法,但是其前處理步驟繁瑣,費用昂貴。酶聯免疫檢測試劑盒則可經濟、快速地檢測嘔吐毒素。

 

【試驗原理】

  嘔吐毒素檢測試劑盒又稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇檢測試劑盒,本試劑盒采用間接競爭(zheng) ELISA方法,在酶標板微孔條上預包被嘔吐毒素抗原,樣本中嘔吐毒素和此抗原競爭(zheng) 結合抗嘔吐毒素抗體(ti) (抗試劑),同時嘔吐毒素抗體(ti) 與(yu) 酶標二抗(酶標物)相結合,經TMB底物顯色,樣本吸光值與(yu) 其所含嘔吐毒素的含量成負相關(guan) ,對照標準曲線,再乘以其對應的稀釋倍數,即可得出樣品中嘔吐毒素的含量。

 

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