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上海信帆生物供應真菌RNA提取試劑盒

更新時間:2020-06-08      瀏覽次數:1962

上海信帆生物供應真菌RNA提取試劑盒,產(chan) 品有大量現貨,除此之外我們(men) 還備有血液RNA提取試劑盒,病毒RNA提取試劑盒等等,歡迎大家谘詢!

 

真菌RNA快速提取試劑盒適用於(yu) 各種形態和各個(ge) 種屬的真菌及革蘭(lan) 氏陽性細菌,包括 Candida albican、Saccharomyces cerevisiae、 Schizosaccharomycespombe、Pichiapastoris、Bacillus subtilis、Staphylococcusaureus 等。

 

(一)菌體(ti) 裂解:

 

1.將 50 mg 的幹菌絲(si) (或 100 mg的鮮菌絲(si) 、或適當數量的真菌菌落)轉移到 1.5 mL 離心管中。對於(yu) 液體(ti) 真菌培養(yang) 物,在1.5mL離心管中多次離心收集1-10 mL 的菌體(ti) 沉澱。

 

2.在菌體(ti) 沉澱中加入 0.4 mL 裂解液I震蕩混勻。

 

注:如果裂解液I存放時產(chan) 生沉澱,請置於(yu) 65℃融化後使用。

 

3.加入 0.4 mL裂解液II,劇烈震蕩 30 s後65℃水浴 5 min。

 

4.12,000-15,000 rpm 離心3 min ,轉移上清到1.5 mL離心管中。

 

5.在上清中加入0.1 mL 的裂解液II和0.1mL氯方(自備)震蕩 30 s混勻。 

 

6.  12,000-15,000 rpm 離心3 min ,轉移上清到5 mL 離心管中。

 

(二)RNA收集:

 

1.  在步驟(一)所得的上清中加入3倍體(ti) 積(約1.5 mL )的結合液III和1倍體(ti) 積(約0.5 mL)的結合液IV,顛倒數次混勻後,分多次上RNA吸附柱,每次上柱後均先室溫放置 2 min,然後 12,000 rpm 離心 1 min,倒掉穿透液。

 

2.  在吸附柱中加入500 μL洗滌液,12,000 rpm離心1 min,棄穿透液。

 

3.  再將吸附柱12,000 rpm離心30 s以甩幹乙醇。

 

4.  將吸附柱放入一個(ge) 幹淨的1.5 mL離心管中。在吸附柱中央加入50 μL洗脫液,室溫靜置2 min。

 

5.  12,000 rpm離心2 min。離心管中溶液即為(wei) RNA 樣品,可以立即使用或存放於(yu) -80℃待用。

 

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