瓊脂糖凝膠CL-4B現貨供應-上海信帆生物

瓊脂糖凝膠CL-4B現貨供應-上海信帆生物

瓊脂糖凝膠CL-4B

規格：10ml/50ml/100ml/500ml

產(chan) 品說明

瓊脂糖凝膠 CL-4B 是在瓊脂糖凝膠 4B 的基礎上通過交聯使微球的剛性增強，理化性能提高，有利用於(yu) 工業(ye)

生物試劑。該介質用於(yu) 生物大分子的凝膠層析。本品呈白色球狀凝膠，無嗅、無味、無肉眼可見雜質。本產(chan) 品具有很

高的化學穩定性、高流速、較好的機械性能、可多次重複使用等特點，非特異性吸附低，回收率高，可用有機溶

劑及 1~2mol/L 的 NaOH 在位清洗，適用於(yu) 工業(ye) 規模生物試劑，廣泛用於(yu) 生物製藥和生物工程下遊蛋白質、核酸及多

肽的凝膠色譜純化。

操作步驟：(僅(jin) 供參考)

1、裝柱

凝膠過濾介質的使用對裝柱的要求較高，為(wei) 了保證分離效果，一般通過柱子上加一個(ge) 裝柱器來使分離柱裝滿

凝膠，或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高於(yu) 60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進行檢驗。

以下過程為(wei) 通用介質裝填過程。若為(wei) 帶有軸向加壓裝置的柱子，可在柱床穩定後將柱床壓緊，接好管路。

（1）讓所有的材料和試劑達到室溫。配製緩衝(chong) 液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫隻用一種低鹽濃度的緩衝(chong) 液。

（2）選擇一根一定直徑的柱子，長約 30~60cm,根據柱子大小取所需量的凝膠（約為(wei) 柱床體(ti) 積的 1.15 倍），清洗掉

20%乙醇，抽幹，用緩衝(chong) 液（按凝膠：緩衝(chong) 液=3：1 的比例）配成勻漿。

（3）將柱內(nei) 及柱子底端用水或緩衝(chong) 液潤濕並保持一小段液位（液麵略高於(yu) 濾膜），務必使底端無氣泡。

（4）用玻璃棒引導勻漿沿著柱內(nei) 壁一次性倒入柱內(nei) ，注意勿使產(chan) 生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nei) 自由沉

降，連結好柱子頂端柱頭。

（5）打開蠕動泵，讓緩衝(chong) 液用使用時流速的 1.33 倍的流速流過，使柱床穩定。用緩衝(chong) 液平衡柱子，到柱床穩定。

（6）好用一個(ge) 裝柱器輔助裝柱。裝完後柱床上端輕輕刮平，上好柱頭。

項目

說明

基質

4%交聯瓊脂糖

排阻極限

6×104~2×107 (球蛋白)

形狀

球形

粒徑

45~165 μm

高流速

30 cm/h*

耐熱

pH7 水中 120℃20min

耐壓

0.025 MPa

pH 穩定性

3~13(長時間)，2~14(短時間，在位清洗)

化學穩定性

可耐 8mol/L 尿素、6mol/L 鹽酸胍；可耐有機溶劑，如乙醇、DMF、THF、DMS、CH3Cl、

丙酮、二甲基甲酰胺、二氯乙烷、吡啶、乙腈

檢測條件

層析柱 10mm×300mm *柱床高 15cm，25℃，流動相為(wei) 0.1mol/LNaCl2、平衡:讓緩衝(chong) 液以一定流速流過柱子，到流出液電導和 pH 不變。

3、上樣:

（1）樣品用緩衝(chong) 液配製，要離心和過濾後上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理，再上樣。

（2）介質對樣品組分的分離是按組分分子量大小進行的，分子量大的先流出來。

（3）上樣體(ti) 積約為(wei) 柱體(ti) 積的 1~2%，越小分離越好。

4、洗脫:用緩衝(chong) 液洗脫，洗脫中保持流速、緩衝(chong) 液組成不變。

5、再生:一般用緩衝(chong) 液洗到平衡，可再次使用。

6、在位清洗

（1）對於(yu) 以離子鍵結合上去的蛋白，可以用 2M Nacl 去除。

（2）對沉澱蛋白、對以疏水性結合的蛋白或脂類，可用 1M NaOH 去除。

（3）對強疏水性結合的蛋白、脂類等，用 4~10 倍柱體(ti) 積的 70%乙醇或 30%異丙醇清洗，但要注意有機溶劑

的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chan) 生氣泡。

清洗完畢後，用至少 3 倍緩衝(chong) 液平衡柱子。

7、去熱源

用 0.5M 的氫氧化鈉清洗柱子 5~6 小時或用 0.1M 的氫氧化鈉 24 小時。或用以下方法步驟去除：

（1）2 倍柱體(ti) 積的 70%乙醇；

（2）2 倍柱體(ti) 積 50mM Tris-HCl pH7.5；

（3）1 倍柱體(ti) 積 4M 尿素；

（4）3 倍柱體(ti) 積的 Tris 緩衝(chong) 液+0.1M NaCl；

以上緩衝(chong) 液都在無熱源的雙蒸水中配製。

8、 消毒:用 0.5~1M NaOH 室溫下洗 8~10 倍柱體(ti) 積，初始緩衝(chong) 液平衡柱子。

注意事項

在裝柱、使用和保存柱子的時候，要避免柱子流幹，氣泡進入

產(chan) 品應密封貯存在 4℃~25℃（保存溶液為(wei) 20% 乙醇），通風、幹燥、清潔的地方。不能冷凍。

用過的柱子貯存在 4℃（20% 乙醇）。

本產(chan) 品避免與(yu) 氧化劑接觸；避免長時間暴露在空氣中。

保質期：5 年。

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