全血線粒體提取試劑盒，現貨供應

全血線粒體(ti) 提取試劑盒，現貨供應

上海信帆生物供應全血線粒體(ti) 提取試劑盒，可以提取血液中線粒體(ti) ，產(chan) 品現貨供應，歡迎大家隨時谘詢！

一，試劑盒組份

組份                          XF9701-A (50T)    XF9701-A (100T)

紅細胞裂解液（10X）              100ml             100ml*2

白細胞裂解液                     50 mL              100 mL

線粒體(ti) 清洗液                      25 mL             50 mL

線粒體(ti) 保存液                     5 mL                 10 mL

二，保存條件

本試劑盒三個(ge) 月內(nei) 使用可 4℃儲(chu) 存，長期可置-20℃。

三，說明

本試劑盒可用於(yu) 從(cong) 血液中分離完整而純化的線粒體(ti) 。

其製備物，可以被用於(yu) 細胞凋亡、信號傳(chuan) 遞、代謝和蛋白組學等的研究。但不適用於(yu) 進一步 DNA 提取。

四，操作步驟

1. 血液處理：

血液要求：非肝素鈉抗凝血，使用新鮮血液。對於(yu) 陳舊血液，由於(yu) 凍凝過程中冰晶已經對細胞核膜和

線粒體(ti) 膜產(chan) 生損傷(shang) ，所以線粒體(ti) 得率會(hui) 大大減少，並且完整性也會(hui) 降低。

a. 對於(yu) 無核紅細胞全血（如哺乳動物處周血），取血約 5ml（適當分成幾管），加入 3 倍體(ti) 積的紅細胞裂

解液（稀釋後的工作液,下同），混勻，800 × g

5 min 離心收集白細胞。加入 1-2ml 紅細胞裂解液（稀

釋後的工作液），吹打重懸白細胞，合並於(yu) 一管中，800 × g 5~10 min 離心收集白細胞。此時如果白細

胞有可見紅色，可再次用少量(0.5ml)紅細胞裂解液洗細一次。

b. 對於(yu) 有核紅細胞全血（如禽類全血），取約 200-300ul 全血，800 × g 5~10 min 離心收集全細胞，用

生理鹽水或者 PBS 清洗兩(liang) 次，留沉澱去上清。清洗時請用去尖吸頭吹打。

2. 在收集到的細胞中，加入 1.0 mL 冰預冷的白細胞裂解液重懸細胞，將細胞懸液轉移到小容量玻璃勻漿

器內(nei) ，0℃冰浴研磨 20~40 次；

3. 勻漿物轉移到離心管，4℃，1000× g 離心 5 min；

4. 取上清，加入一新的離心管中，4℃，1000× g 再次離心 5 min（一共兩(liang) 次離心，完整去核）。

5．取上清，加入一新的離心管中，4℃， 12,000 × g 離心 10 min。離心後的上清含胞漿成分，可從(cong) 中

提取胞漿蛋白。將上清轉移到新離心管，線粒體(ti) 沉澱在管底；

6. 在線粒體(ti) 沉澱中加入 0.5 mL 線粒體(ti) 清洗液重懸線粒體(ti) 沉澱，4℃，1000× g 離心 5 min(再次去核）；

7．取上清，加入一新的離心管中，4℃， 12,000 × g 離心 10 min。棄上清，高純度的線粒體(ti) 沉澱在管

底；

8. 用 50 -100μL 線粒體(ti) 保存液或合適的反應緩衝(chong) 液重懸線粒體(ti) 沉澱，立即使用或-70℃保存。

四 注意事項：

為(wei) 保證獲得完整及盡可能多的線粒體(ti) ，勻漿條件要示：一是全程低溫操作。第二是快速。第三，如有條

件可將勻漿後的碎片在顯微鏡下觀察。

全血線粒體(ti) 提取試劑盒，現貨供應