PRODUCT CLASSIFICATION
產品分類上海信帆生物供應低密度脂蛋白膽固醇測試盒,提供LDL-C實驗代測服務
低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測試盒說明書(shu)
(直接法)
一、試劑組成及配製(100 管/96 樣):
試劑組成 | 規 格 | 組 份 | 濃 度 | 保存條件 |
R1 |
75ml×1 瓶 | Good’s 緩衝(chong) 液 | 50mmol/L |
2~8℃ 避光保存 |
4-氨基安替比林 | 0.2mmol/L | |||
氯化鎂.6 合水 | 15mmol/L | |||
膽固醇氧化酶 | ≥3KU | |||
膽固醇酯酶 | ≥2KU | |||
過氧化物酶 | ≥5KU | |||
表麵活性劑 1 | 0.1% | |||
R2 |
25ml×1 瓶 | Good’s 緩衝(chong) 液 | 50mmol/L | |
Toos | 1.0mmol/L | |||
防腐劑 | 100mg/L | |||
表麵活性劑 2 | 0.1% | |||
校準品 | 0.1ml×1 支 | 膽固醇 | 4.3mmol/L |
三、測定步驟:
1、樣本處理:
①、血清(漿):直接測定,如超過線性範圍用生理鹽水稀釋後測定。
②、培養(yang) 液樣本:吸取培養(yang) 液,1000 轉/分,離心 10 分鍾,取上清測定。
[注]:一般建議細胞密度在 100 萬(wan) 個(ge) /ml 以上。
③、組織樣本:準確稱取組織重量,按重量(g):體(ti) 積(ml)=1:9 的比例,加入 9 倍體(ti) 積的勻漿介 質,冰水浴條件下機械勻漿,2500 轉/分,離心 10 分鍾,取上清液待測。
[注]:1、如組織樣本為(wei) 非高脂樣本,勻漿介質統一用磷酸鹽緩衝(chong) 液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進行提取。 2、如組織樣本為(wei) 高脂樣本或部分為(wei) 高脂樣本,勻漿介質可統一用無水乙醇進行提取。
④、細胞樣本:
A、細胞收集:將製備好的細胞懸液取出,1000 轉/分,離心 10 分鍾,棄上清液,留細胞沉 澱;用等滲緩衝(chong) 液(推薦 0.1mol/L 、pH7~7.4 磷酸鹽緩衝(chong) 液)清洗 1~2 次,同樣 1000 轉/分,離心 10 分鍾,棄上清液,留細胞沉澱;
B、細胞破碎:加入 0.2~0.3ml 的勻漿介質(推薦 0.1mol/L、pH7~7.4 磷酸鹽緩衝(chong) 液或生理 鹽水)進行勻漿,冰水浴條件下超聲破碎(功率:300W,3~5 秒/次,間隔 30 秒,重複 3~ 5 次)或手動勻漿,製備好的勻漿液不離心待測。也可采用裂解液裂解(推薦 TritonX-100,
1~2%,裂解 30~40 分鍾),裂解好的液體(ti) 不離心直接測定
[注]:一般建議細胞密度在 100 萬(wan) 個(ge) /ml 以上。破碎好的液體(ti) 可顯微鏡觀察細胞是否破碎*
1、試劑空白管吸光度≤0.050(光徑 0.5cm)。
2、靈敏度:測試 2.6mmol/L 被測物時,吸光度差值△A 為(wei) 0.180~0.280
3、線性範圍:2~12mmol/L,r2>0.995
4、精密度:變異係數≤8%,批間差:相對偏差≤10%
5、穩定性:原包裝試劑盒在 2℃~8℃避光保存,有效期為(wei) 12 個(ge) 月。開啟後 2℃~8℃避光保存, 可穩定一個(ge) 月。
四、注意事項:
1、本產(chan) 品僅(jin) 用於(yu) 科研,不得用於(yu) 研究診斷,切勿服用。
2、樣品含量如超出檢測範圍上*,可用生理鹽水稀釋樣本後進行測定,測定結果乘以稀釋倍數。
3、試劑防止葡萄糖、膽固醇等試劑的汙染。
4、試劑與(yu) 樣本量可按照比色杯體(ti) 積,按比例增減。
2、樣品含量如超出檢測範圍上*,可用生理鹽水稀釋樣本後進行測定,測定結果乘以稀釋倍數。
3、試劑防止葡萄糖、膽固醇等試劑的汙染。
4、試劑與(yu) 樣本量可按照比色杯體(ti) 積,按比例增減。
低密度脂蛋白膽固醇測試盒現貨供應,提供LDL-C實驗代測服務