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明膠酶譜分析試劑盒操作要領

更新時間:2019-05-28      瀏覽次數:1407

明膠酶譜分析試劑盒操作要領!

上海信帆生物供應明膠酶譜分析試劑盒,操作簡單方便,可以同時檢測MMP2和MMP9的活性,操作方法和免疫印跡相類似。

操作要領:

1.製備聚丙烯酰胺時應注意排除氣泡。

2.明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和PH值等因素的影響,因此緩衝(chong) 液配製應嚴(yan) 格準確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。

3.用大梳子。

4.孵育液的PH在7.5-7.6,複性的TRITON時間長了會(hui) 有絮狀物,所以實驗時盡量使用新鮮配置的。

5.孵育的37度不要在CO2培養(yang) 箱中,因為(wei) 會(hui) 改變孵育液的PH值,在普通孵箱即可。

6.明膠要4度保存,配好後1周內(nei) 使用。

7.樣本活性低可以延長孵育時間到48小時

MMP檢測注意事項:細胞培養(yang) 基要用無血清培養(yang) 基;樣本裂解時不含EDTA,明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和PH值等因素的影響,因此緩衝(chong) 液 配製應嚴(yan) 格準確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。因為(wei) 檢測蛋白活性,所以應盡量避免蛋白變性,一般都要求冰上操作,電泳也放在冰水裏進行的。

附上一張明膠酶譜試劑盒的條帶圖

明膠酶譜分析試劑盒操作要領

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