紅細胞裂解液（RBC Lysis Buffer,10×） 操作步驟

紅細胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×) 操作步驟：

注意：絕大多數情況下，應使用無菌去離子水稀釋RBC Lysis Buffer(10×)至1×使用，流式細胞術除外。

A、組織細胞樣本的常規操作

1、製備細胞懸液: 新鮮組織經過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，通過適當方法製備成細胞懸液，離心棄上清。

2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂解1～2min。 3、離心，棄紅色上清。本步驟亦可在室溫下操作。

4、如果發現紅細胞裂解不*，可以重複上述步驟2和步驟3各一次。

5、洗滌：根據實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yang) 液，輕柔混勻重懸沉澱。4℃離心，棄上清，該離心步驟亦可在室溫下操作。

B、組織細胞樣本的快速操作(無需洗滌)

1、製備細胞懸液：新鮮組織經胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，製備細胞懸液，離心棄上清。

2、裂解：加入細胞5倍細胞沉澱體(ti) 積的1×RBC Lysis Buffer，輕柔吹打混勻裂解。

3、加入PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yang) 液，輕柔混勻。

4、離心5min，棄紅色上清，本離心步驟亦可在室溫下操作。

5、如果發現紅細胞裂解不*，可以重複上述步驟2～4各一次。

6、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉澱，進行計數、培養(yang) 等後續實驗。

C、血液樣本的常規操作

1、取新鮮抗凝血，離心，棄上清。

2、 裂解：加入1×RBC Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂解1～5min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。

3、離心：棄紅色上清。本步驟亦可在室溫下操作。

4、如果發現紅細胞裂解不*，可以重複上述步驟2和步驟3一次。

5、洗滌： 根據實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yang) 液，輕柔混勻重懸沉澱；4℃離心，棄上清，該離心步驟亦可在室溫下操作。

6、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉澱，進行計數、培養(yang) 等後續實驗。

D、血液樣本的快速操作(無需洗滌)

1、新鮮抗凝血中加入10倍體(ti) 積的1×RBC Lysis Buffer，輕輕吹打混勻，裂解4～15min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。

2、加入 PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yang) 液，輕柔混勻。

3、離心，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。

4、如果發現紅細胞裂解不*，可以重複上述步驟2和步驟3一次。

5、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉澱，進行計數、培養(yang) 等後續實驗。

   信帆生物對質量的控製涵蓋生物試劑、放行、市場質量反饋的全過程，包括原輔料、包裝材料、工藝用水、中間過程及成品的質量標準和分析方法的建立、取樣、檢驗和產(chan) 品穩定性考察和市場不良反饋樣品的複核等工作，確保產(chan) 品品質。信帆生物致力於(yu) 追求企業(ye) 的長期發展，以創新為(wei) 根本，不斷優(you) 化運作，為(wei) 每一位科研用戶提供更的產(chan) 品和更熱情的服務。