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產品分類λ噬菌體(ti) 基因組DNA提取試劑盒如何正確使用
上海信帆生物公司的λ噬菌體(ti) 基因組DNA提取試劑盒,操作簡單,價(jia) 格實惠,資料穩定。是簡便的λ噬菌體(ti) 基因組DNA的試劑盒,其提取原理是通過PEG沉澱、酚異戊醇等提取,殘留碎片通過沉澱離心去除,通過一係列快速的漂洗、離心步驟,將鹽、細胞代謝物、蛋白等雜質去除。
獲得λ噬菌體(ti) 基因組DNA,可進行酶切、PCR等下遊實驗,獲得DNA的量很高,但是純度一般,但是足夠用於(yu) 大多數分子生物學實驗。
噬菌體(ti) 載體(ti) 廣泛用於(yu) 文庫篩選,目的克隆培養(yang) 獲得大量的噬菌體(ti) 顆粒需要提取λ噬菌體(ti) DNA來開展測序等後續工作。λ噬菌體(ti) 裂解培養(yang) 物離心後的上清,首先用RNaseA/DNaseⅠ混合酶消化去除殘留的宿主菌DNA/RNA,沉澱收集噬菌體(ti) 。
λ噬菌體(ti) 基因組DNA提取試劑盒如何正確使用
1、用於(yu) 裂解的噬菌體(ti) 、宿主菌越新鮮,裂解越好、收獲量越大。
2、液體(ti) 培養(yang) 裂解時,到了時間裂解還沒發生,可適當的提高溫度或加大振搖速度。
3、RNase/DNase消化過度,可能減少產(chan) 量;消化不*,可粘走部分噬菌體(ti) 。
4、噬菌體(ti) 裂解液在低溫下易結晶析出白色物質,可37℃溫浴至*溶解。
λ噬菌體(ti) 是長尾噬菌體(ti) 科的一種溫和噬菌體(ti) 。λ噬菌體(ti) 是雙鏈DNA噬菌體(ti) ,有直徑55nm的二十麵體(ti) 頭部,末端有細長尾絲(si) 的非收縮尾。DNA是線性分子,有黏性末端即單鏈延伸12個(ge) 核苷酸,故感染後線性基因組可立即環化。
λ DNA有一個(ge) 噬菌體(ti) 結合位點,可與(yu) 細菌結合位點形成堿基配對,細菌結合位點位於(yu) 大腸杆菌染色體(ti) 上半乳糖或gal操縱子和生物素操縱子之間。兩(liang) 個(ge) 位點配對後,整合酶在一種特異宿主蛋白的輔助下催化病毒和細菌DNA鏈和物理交換,環狀λ DNA以線性整合進大腸杆菌DNA上毗鄰gal操縱子的位置,稱之為(wei) 前噬菌體(ti) 。
λ噬菌體(ti) 基因組DNA提取試劑盒如何正確使用