elisa檢測服務對標本的要求
1.標本采集後盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放於-20℃保存,但應避免反複凍融
2.不能檢測含nan3的樣品,因nan3抑製辣根過氧化物酶的(hrp)活性。
人蓖麻毒素(ricin)elisa檢測試劑盒操作步驟
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其餘各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50µl。然後在待測樣品孔先加樣品稀釋液40µl,然後再加待測樣品10µl。加樣將樣品加於酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩幹,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,如此重複5次,拍幹。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑a50µl,再加入顯色劑b50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鍾.
10.終止:每孔加終止液50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(od值)。測定應在加終止液後15分鍾以內進行。