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發福利了!信帆生物為您提供:實驗室常用的染色液的配方集錦

更新時間:2018-08-31      瀏覽次數:2659

發福利了!信帆生物為(wei) 您提供:實驗室常用的染色液的配方集錦

染色液是實驗室中常用的試劑之一,分為(wei) 天然染液和人工染料,也分堿性染料和酸性染料,以下來詳細介紹一下實驗室常見染色液的配製。


⒈ 碘-碘化鉀(I2-KI)溶液 能將澱粉染成藍紫色,蛋白質染成黃色,也是植物組織化學測定的重要試劑。 
配方:碘化鉀2g ;蒸餾水300ml ; 碘1g 
先將碘化鉀溶於(yu) 少量蒸餾水中,待全溶解後再加碘,振蕩溶解後稀釋至300mL,保存在棕色玻璃瓶內(nei) 。用時可將其稀釋2-10倍,這樣染色不致過深,效果更佳。 


⒉ 蘇丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角質化的細胞壁及脂肪、揮發油、樹脂等染成紅色或淡紅色,是的脂肪染色液。 
配方:(1)蘇丹III或蘇丹Ⅳ幹粉 ; 95%酒精10ml ; 過濾後再加入10ml甘油 
(2)先將蘇丹III或IV溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml。 
(3)蘇丹III 70%乙醇的飽和溶液。 


⒊ 1%醋酸洋紅(aceto carmine) 酸性染料,適用於(yu) 壓碎塗抹製片,能使染色體(ti) 染成深紅色,細胞質成淺紅色。 
配方:洋紅1g ; 45%醋酸100ml 
煮沸2h左右,並隨時注意補充加入蒸餾水到原含量,然後冷卻過濾,加入4%鐵明礬溶液1~2滴(不能多加,否則會(hui) 發生沉澱),放入棕色瓶中備用。 


⒋ 改良苯芬品紅染色液(Carbol fuchsine) 核染色劑。 
配製步驟: 先配成三種原液,再配成染色液。 
原液A:3g堿性品紅溶於(yu) 100ml 70%酒精中。 
原液B:取原液A10ml加入到90ml 5%石炭酸水溶液中。 
原液C:取原液B 55ml,加入6ml冰醋酸和6ml福爾馬林(38%的甲醛)。 
(原液A和原液C可長期保存,原液B限兩(liang) 周內(nei) 使用) 
染色液:取C液10~20ml,加45%冰醋酸80~90ml,再加山梨醇1~,配成10%~20%濃度的石炭酸品紅液,放置兩(liang) 周後使用,*(若立即用,則著色能力差)。 
適用範圍:適用於(yu) 植物組織壓片法和塗片法,染色體(ti) 著色深,保存性好,使用2~3年不變質。山梨醇為(wei) 助滲劑,兼有穩定染色液的作用,假如沒有山梨醇也能染色,但效果較差。 


⒌ 中性紅(neutral red)溶液 用於(yu) 染細胞中的液泡,可鑒定細胞死活。 
配方:中性紅 ;蒸餾水100ml 
使用時再稀釋10倍左右。 


⒍ 曙紅Y(伊紅,eosin Y)酒精溶液 常與(yu) 蘇木精對染,能使細胞質染成淺紅色,起襯染作用。 
配方:曙紅 ; 95%酒清100ml 
也常用於(yu) 95%酒精脫水時,加入少量曙紅溶液,其目的是在包埋、切片、展片、鏡檢時便於(yu) 識別材料。 


⒎ 釕紅(ruthenium red)染液 釕紅是細胞胞間層專(zhuan) 性染料,其配後不易保存,應現用現配。 
配方:釕紅5~10mg ; 蒸餾水25-50ml 


⒏ 龍膽紫(gentian violet) 為(wei) 酸性染料,適用於(yu) 細菌塗抹製片。 
配方:龍膽紫0.2~1 g ;蒸餾水100ml 


⒐ 苯胺蘭(lan) (aniline blue)溶液 為(wei) 酸性染料,對纖維素細胞壁、非染色質的結構、鞭毛等,尤其是染絲(si) 狀藻類效果好。還多用於(yu) 與(yu) 真曙紅作雙重染色,對於(yu) 高等植物多用於(yu) 與(yu) 番紅作雙重染色。 
配方:苯胺蘭(lan) 1 g ; 35%或95%酒精100ml 


⒑ 間本三分(phloroglucin)溶液用於(yu) 測定木質素。 
配方:間本三分5g ; 95%酒精100ml 
注:此溶液呈黃褐色即失效。 


⒒ 橘紅G(orange G)酒精溶液 為(wei) 酸性染料,染細胞質,常作二重或三重染色用。 
配方:橘紅G 1g ; 95%酒精100ml 
⒓ 番紅(safranin O)為(wei) 堿性染料,適用於(yu) 染木化、角化、栓化的細胞壁,對細胞核中染色質、染色體(ti) 和花粉外壁等都可染成鮮豔的紅色。並能與(yu) 固綠、苯胺蘭(lan) 等作雙重染色,與(yu) 橘紅G、結晶紫作三重染色。

 
配方:(1)番紅水溶液番紅0.1或1 g ;蒸餾水100ml 
(2)番紅酒精溶液番紅0.5或1 g ;50%(或95%)酒精100ml 
(3)苯胺番紅酒精染色液 
甲液 番紅5 g +95%酒精50ml 
乙液 苯胺油20ml +蒸餾水450ml 
將甲、乙二溶液混合後充分搖均勻,過濾後使用。 


⒔ 固綠(fast green)又稱快綠溶液。為(wei) 酸性染料,能將細胞質,纖維素細胞壁染成鮮豔綠色,著色很快,故要很好的掌握著色時間。 
配方:(1)固綠酒精液固綠0.1 g ; 95%酒精100ml 
(2)苯胺固綠酒精液固綠 1 g ;* 100ml ;苯胺油 4ml 
配後充分搖勻,過濾後使用。現配現用效果好。 


⒕ 蘇木精(hematoxylin)染液蘇木精是植物組織製片中應用廣的染料,是蘇木科植物蘇木的心材提取出來的。它是很強的細胞核染料,而且可以分化出不同顏色。配方很多,現舉(ju) 海登漢氏(Heidenhain's)蘇木精染色液,又稱鐵礬蘇木精染色液。 
配方:甲液(媒染劑): 硫酸鐵銨(鐵明礬)2-4g ;蒸餾水100ml 
(必須保持新鮮,臨(lin) 用之前配製) 
乙液(染色劑):蘇木精 0.5-1g ;95%酒精 10ml;蒸餾水 90ml 
配製步驟:(1)將蘇木精溶於(yu) 酒精中,瓶口用雙層紗布包紮,使其充分氧化(通常在室內(nei) 放置兩(liang) 個(ge) 月後方可使用)。(2)加入蒸餾水,塞緊瓶口,置冰箱中可長期保存。 
切片需先經甲液媒染,並充分水洗後才能以乙液染色,染色後經水稍洗再用另一瓶甲液分色至適度。 
鐵礬蘇木精染液為(wei) 細胞學上染細胞核內(nei) 染色質的染色劑,但要注意甲液與(yu) 乙液在任何情況下決(jue) 不能混合。 


⒖亞(ya) 甲基藍染液 常用於(yu) 細菌、活體(ti) 細胞等的染色。 
取亞(ya) 甲基藍,溶於(yu) 100ml蒸餾水中即成。 


⒗詹納斯綠B(Janus green B)染色液 
將 綠溶於(yu) 100ml蒸餾水,配成飽和水溶液。用時需稀釋。稀釋的倍數應視材料不同而異。 


⒘硫堇染色液 
取克硫堇(也稱勞氏青蓮或勞氏紫)粉末,溶於(yu) 100ml蒸餾水中,即可使用。使用此液時,需要用微堿性自來水封片或用1%NaHCO3水溶液封片,能成多色反應。 


18.黑色素液 
水溶性黑素10g,蒸餾水100mL,甲醛(福爾馬林)。可用作莢膜的背景染色。 


19.墨汁染色液 國產(chan) 繪圖墨汁40mL,甘油2mL,液體(ti) 石炭酸2mL。先將墨汁用多層紗布過濾,加甘油混勻後,水浴加熱,再加石炭酸攪勻,冷卻後備用。用作莢膜的背景染色。 


20.呂氏(Loeffier)美藍染色液 
A液:美藍(methylene blue,又名甲烯藍),95%乙醇30mL; 
B液:。 
混合A液和B液即成,用於(yu) 細菌單染色,可長期保存。根據需要可配製成稀釋美藍液,按1∶10或1∶100稀釋均可。

 
21.革蘭(lan) 氏染色液 
(1)結晶紫(cristal violet)液:結晶紫乙醇飽和液(結晶紫2g溶於(yu) 20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸銨水溶液80mL。將兩(liang) 液混勻置24h後過濾即成。此液不易保存,如有沉澱出現,需重新配製。 
(2)蘆戈(Lugol)氏碘液:碘1g,KI 2g,蒸餾水300mL。先將KI溶於(yu) 少量蒸餾水中,然後加入碘使之*溶解,再加蒸餾水至300mL,即成。配成後貯於(yu) 棕色瓶內(nei) 備用,如變為(wei) 淺黃色能使用。 
(3)95%乙醇:用於(yu) 脫色,脫色後可選用以下(4)或(5)的其中一項複染即可。 
(4)稀釋石炭酸複紅溶液:堿性複紅乙醇飽液(堿性複紅1g,95%乙醇10mL,5%石炭酸90mL)10mL,加蒸餾水90mL。 
(5)番紅溶液:番紅O(safranine O,又稱沙黃O),95%乙醇100mL,溶解後可貯存於(yu) 密閉的棕色瓶中,用時取20mL與(yu) 80mL蒸餾水混勻即可。 
以上染色液配合使用,可區分出革蘭(lan) 氏染色陽性(G+ )或陰性(G- )細菌,前者藍紫色,後者淡紅色。 


22.齊氏(Ziehl)石炭酸複紅液:堿性複紅溶於(yu) 95%乙醇10mL中為(wei) A液;溶液100mL為(wei) B液。混合A、B液即成。 


23.姬姆薩(Giemsa)染色液 
(1)貯存液:稱取姬姆薩粉,甘油33mL,甲醇33mL。先將姬姆薩粉研細,再逐滴加入甘油,繼續研磨,後加入甲醇,在56℃放置1-24h後即可使用。 
(2)應用液(臨(lin) 用時配製):取1mL貯存液加19mLpH7.4磷酸緩衝(chong) 液即成。也可以貯存液∶甲醇=1∶4的比例配製成染色液。 


24. 1%瑞氏(Wright's)染色液 
稱取瑞氏染色粉6g,放研缽內(nei) 磨細,不斷滴加甲醇(共600mL)並繼續研磨使溶解。經過濾後染液須貯存一年以上才可使用,保存時間愈久,則染色澤愈佳。 
以上就是一些目前實驗室中常用染色液的配置方法。

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