X-Gal，β-半乳糖苷酶的顯色底物

X-Gal，β-半乳糖苷酶的顯色底物

X-Gal，5-溴-4- 氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷的產(chan) 品性質

上海信帆生物供應X-Gal，5-溴-4- 氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷，產(chan) 品質量穩定，現貨供應，歡迎大家！

產(chan) 品描述

X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的顯色底物，在β-半乳糖苷酶的催化下會(hui) 產(chan) 生藍色產(chan) 物。基於(yu) 這個(ge) 特點，當pUC係列載體(ti) DNA以lacZ 缺欠細胞作為(wei) 宿主進行轉化時，或M13噬菌體(ti) 載體(ti) DNA進行轉染時，如果在培養(yang) 基中加入X-Gal和IPTG，由於(yu) β–半乳糖苷酶的α–互補性，可以根據是否呈現白色而方便地挑選擇出基因重組體(ti) 。

常用於(yu) β-半乳糖苷酶的原位染色檢測以及藍白斑篩選。

運輸與(yu) 保存方法

冰袋運輸。-20 ºC避光保存。

產(chan) 品性質

注意事項

1）為(wei) 了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作；

2）含有 X-Gal 的培養(yang) 基 4℃避光保存，須在1周內(nei) 使用。

配製儲(chu) 存液

稱取200 mg X-Gal於(yu) 15 mL 離心管，向其中加入10 mL DMF，旋渦震蕩使其充分溶解後於(yu) -20℃避光保存，正確操作下，有效期可達5-12個(ge) 月，如小量頻繁使用，建議分裝成1 mL/管後避光凍存。

X-Gal，5-溴-4- 氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷的產(chan) 品性質

X-Gal，β-半乳糖苷酶的顯色底物

藍白斑篩選

1. X-Gal、IPTG 加入瓊脂培養(yang) 基溶液

1）高壓滅菌已加瓊脂的培養(yang) 基，並冷卻到50℃左右。

2）每毫升培養(yang) 基內(nei) 加入10 μL20 mg/mL X-gal 溶液、10 μL 0.1 M的IPTG（使其終濃度達到1 mM）；

3）加入適量抗生素；

4）混勻後按照平板大小倒入適量培養(yang) 基，待培養(yang) 基冷卻至室溫後，接種細菌於(yu) 37℃過夜培養(yang) 。

2. X-Gal、IPTG加到瓊脂平板表麵

1）於(yu) 無菌超淨工作台製備平板（如LB 瓊脂板）；

2）取40 μL 100 mM IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合，均勻地塗布於(yu) 準備好的平板上；

【注】：平板邊緣較難充分塗布均勻，容易產(chan) 生假陽性，因此，為(wei) 了得到更好結果，建議後續操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。

3）37℃ 孵育直至所有液體(ti) 被吸收（30 min或更長）。接種細菌於(yu) 37℃過夜培養(yang) 。

X-Gal，β-半乳糖苷酶的顯色底物