Western blot細胞樣本的處理小貼士

Western blot細胞樣本的處理小貼士

上海信帆生物代做Western blot實驗，下麵我們(men) 給大家分享一下細胞樣本中關(guan) 於(yu) 懸浮細胞和貼壁細胞樣本的處理方法，希望對大家有所幫助，如果還有不清楚的地方，ky体育亚洲杯，您身邊的科研專(zhuan) 家！

細胞樣本做WB檢測
1、懸浮細胞樣品：把細胞及培養(yang) 液一起收集到15ml或者50ml離心管中，1500rpm離心3min，棄去上清；加入PBS輕輕吹打，1500rpm離心3min，棄去上清；反複3次，棄去上清後於(yu) -80度或者液氮凍存待用。在避免凍融的情況一般保存1年，建議盡快檢測。

2、貼壁細胞樣品：
2.1 胰酶消化：用胰酶將細胞消化後，收集到15ml或者50ml離心管中，1500rpm離心3min，棄去上清；加入PBS輕輕吹打，1500rpm離心3min，棄去上清；反複3次，棄去上清後於(yu) -80度或者液氮凍存待用。在避免凍融的情況一般保存1年，建議盡快檢測。

2.2 細胞刮子收集細胞：對於(yu) 某些蛋白（即對胰酶比較敏感或者實驗特殊要求，如E-Cadherin不易用胰酶消化後進行WB檢測），直接用細胞刮子刮下細胞，收集到EP、15ml或者50ml離心管中，1500rpm離心3min，棄去上清；加入PBS輕輕吹打，1500rpm離心3min，棄去上清；反複3次，棄去上清後於(yu) -80度或者液氮凍存待用。在避免凍融的情況一般保存1年，建議盡快檢測。

信帆生物實驗室服務內(nei) 容包括Western blot實驗檢測，RT-PCR實驗檢測，免疫組化實驗檢測，放射免疫實驗檢測，生化實驗檢測，ELISA實驗檢測等等，歡迎大家！