葡聚糖凝膠使用說明，葡聚糖凝膠現貨供應

葡聚糖凝膠使用說明，葡聚糖凝膠現貨供應

葡聚糖凝膠使用說明

葡聚糖凝膠（Sephadex）是白色珠狀顆粒，由葡聚糖經醚鍵相互交聯聚合而成具有多孔性三度空間網狀結構的高分子分離材料，為(wei) 穩定的親(qin) 水性凝膠，在水中和電解質中很容易溶脹。不同型號的葡聚糖用英文字母 G 表示，如 G-25，G-75 等，G 後麵的數字除以 10 為(wei) 該凝膠每克幹重所吸收水的毫升數。能使一定分子範圍的大分子進入凝膠的網狀結構內(nei) 。溶脹程度不同，分離分級範圍也不同。具體(ti) 產(chan) 品的分離範圍及應用如下：

產(chan) 品性質

化學穩定性：葡聚糖那不溶於(yu) 一切溶劑（除非它被水解），在水、鹽溶液、有機溶劑、堿和

弱酸性溶液中都有很好的穩定性，在強酸中凝膠骨架的糖苷鍵被水解。長期接觸氧化劑容易

破壞凝膠，所以應該避免使用。在濕空氣中易長黴，可用氯、甲苯、疊氮鈉做防腐劑。

物理穩定性：葡聚糖凝膠並不熔融，可以在濕態、中性 pH 進行滅菌或者高壓滅菌 120°C，

30 分鍾不影響它的色譜性質。幹態的凝膠加熱至 120°C 以上開始焦糖化。

產(chan) 品用途

利用分子篩作用，主要用於(yu) 除鹽、多肽分離、清洗生物提取液，分子量的測定。

使用方法

1.凝膠預溶脹

在凝膠使用前，首先將其溶脹，具體(ti) 方法：室溫下，將幹粉浸泡在超純水中充分溶脹 24 小

時，並不斷攪拌保證凝膠 充分溶脹；或者在室溫下，將幹粉浸泡在 50-60%乙醇中至少 24

小時，並不斷攪拌以保證凝膠*溶脹，用超純水洗去乙醇；

2.裝柱

將溶脹好的凝膠根據裝柱要求一次性注入柱內(nei) ，注意要避免柱內(nei) 產(chan) 生氣泡或者斷層，保持濕態裝柱，可在凝膠可承受的操作壓下裝柱，保證裝柱均勻，裝完柱可以檢測柱效，檢查凝膠裝填是否合格。

3.平衡

上樣前用平衡液平衡層析柱至少 3-5 個(ge) 柱體(ti) 積直到基線平穩；

4.上樣

凝膠過濾的上樣量一般為(wei) 5%的柱床體(ti) 積，初次上樣建議控製在 1-2%的床體(ti) 積，視分離情況可以調整；脫鹽時上樣量可以達到 20%的柱床體(ti) 積，柱高的選擇也與(yu) 分離要求相關(guan) ，柱高控製在 40-50cm 以下，過高的凝膠層會(hui) 引起較大的反壓，應當盡可能避免。難分離物質要有一定柱高和流速控製，脫鹽時高徑比為(wei) 5：1 即可

5.洗脫方法

可以用無鹽水，也可以采用上柱時的緩衝(chong) 液洗脫；在上柱 Buffer 中加入 NaCl 等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化；

6.在位清洗（CIP）

凝膠使用十次後作一次 CIP，目的是去除柱床內(nei) 沉澱的及頑固殘留的蛋白。方法是以 40cm/h

用 1M 氫氧化鈉反向洗四個(ge) 柱體(ti) 積，再以至少三個(ge) 柱體(ti) 積平衡緩衝(chong) 液再生。

7.保存

凝膠使用完後，可將其回收，可將凝膠用超純水衝(chong) 洗幹淨並濾幹，加入 0.02%的疊氮鈉做為(wei) 防腐劑，或者浸泡在 20%的乙醇中，防止長菌。