PRODUCT CLASSIFICATION
產品分類人外周血分離液試劑盒現貨供應啦!
規格:200 mL/kit
保存:本產(chan) 品對光敏感,應該室溫避光儲(chu) 存,保質期2 年。無菌開封後,保存於(yu) 室溫。
試劑盒組成:
各種動物外周血白細胞分離液200mL
細胞洗滌液200mL
紅細胞裂解液100mL
操作步驟:
1. 取新鮮抗凝全血(EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝均可)或者去纖維蛋白血液。
2. 在離心管中加入適量分離液(血液體(ti) 積小於(yu) 5mL時,加入5mL分離液;大於(yu) 等於(yu) 5mL,加入等體(ti) 積分離液。但二者的總體(ti) 積不能超過離心管的三分之二,否則會(hui) 影響分離效果),將血液平鋪到分離液液麵上方,注意保持兩(liang) 液麵界麵清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取血液,然後將血液小心的平鋪於(yu) 分離液上,因為(wei) 兩(liang) 者的密度差異,將形成明顯的分層界麵。如果樣品較多,加樣的時間較長,在離心之前出現紅細胞成團下沉屬正常現象。)
3. 室溫,水平轉子500~1000g,離心20~30min(血液的體(ti) 積越大所需的離心力越大,離心時間越長,*的分離條件需摸索,離心轉速zui大不超過1200g)。
4. 離心後將出現明顯的分層:zui上層是稀釋的血漿層;血漿與(yu) 分離液之間是淋巴細胞層;分離液中為(wei) 粒細胞層(個(ge) 體(ti) 差異或者是分離條件不同,粒細胞層可能分離不明顯);zui下層為(wei) 紅細胞層。
人外周血分離液試劑盒現貨供應啦!
5. 小心的吸取淋巴細胞層及分離液層細胞到15mL潔淨的離心管中,10mL PBS或細胞洗滌液洗滌細胞。250g,離心10min(如有紅細胞混雜則加入適量紅細胞裂解液)
6. 棄上清,5mL的PBS或細胞清洗液重懸細胞,250g,離心10min。
7. 重複步驟6
8. 棄上清,細胞重懸備用。
注意事項:
A. 開封前顛倒混勻,本分離液為(wei) 無菌產(chan) 品,為(wei) 延長分離液保存時間,請在無菌條件下啟封,避免微生物汙染。。
B. 分離液使用時應始終保持室溫(18℃~25℃),如室內(nei) 溫度較低,可將分離液預熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心,可能會(hui) 導致白膜層中紅細胞汙染加重。
C. 血液樣本為(wei) 新鮮抗凝血(采血2 h以內(nei) ),為(wei) 保持淋巴細胞的活性,應避免冷凍和冷藏。
D. 血液樣本不需稀釋,直接進行分離即可。
E. 稀釋血液或洗滌細胞,不可使用含Ca、Mg離子的緩衝(chong) 液及培養(yang) 液,其成分會(hui) 導致血細胞凝集,
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