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丙二醛含量測試盒真的太棒了!

更新時間:2017-12-05      瀏覽次數:2269

丙二醛含量測試盒真的太棒了!

測定意義(yi) :
 

氧自由基作用於(yu) 脂質的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質;後者逐漸分解為(wei) 一係列複雜的化合
物,其中包括MDA。通過檢測MDA 的水平即可檢測脂質氧化的水平。

 

測定原理:
 

MDA 與(yu) 硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chan) 物,在532nm 有zui大吸收
峰,進行比色後可估測樣品中過氧化脂質的含量;同時測定600nm 下的吸光度,利用532nm
與(yu) 600nm 下的吸光度的差值計算MDA 的含量。

 

需自備的儀(yi) 器和用品:
 

可見分光光度計/酶標儀(yi) 、水浴鍋、台式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、
研缽、冰和蒸餾水。

 

試劑的組成和配置:
 

提取液:液體(ti) 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體(ti) 30mL×1 瓶,4℃保存;

 

MDA 提取:

1、細菌、細胞或組織樣品的製備:
細菌或培養(yang) 細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nei) ,離心後棄上清;按照細菌或細胞數量
(104 個(ge) ):提取液體(ti) 積(mL)為(wei) 500~1000:1 的比例(建議500 萬(wan) 細菌或細胞加入1mL 提
取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重複30 次);
8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g):提取液體(ti) 積(mL)為(wei) 1:5~10 的比例(建議稱取約0.1g 組織,
加入1mL 提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測

注意事項:
 

臨(lin) 用前注意試劑一是否*溶解,如未溶解,可以70℃-90℃加熱,並振蕩以促進溶解。

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