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6-磷酸葡萄糖脫氫酶試劑盒太棒了!

更新時間:2017-11-20      瀏覽次數:1370

6-磷酸葡萄糖脫氫酶試劑盒太棒了!

測定意義(yi) :
G6PDH(EC 1.1.1.49)廣泛存在於(yu) 動物、植物、微生物和培養(yang) 細胞中,是磷酸戊糖途徑的關(guan)
鍵酶,催化 6-磷酸葡萄糖氧化為(wei) 6 -磷酸葡萄糖酸內(nei) 酯,同時將NADP+還原為(wei) NADPH,供
生物合成及維持細胞內(nei) 的還原狀態用。因此6-磷酸葡萄糖脫氫酶活性的高低可以從(cong) 一定程
度上反映出生物體(ti) 的生物合成和抗氧化能力。
 

測定原理:
G6PDH 催化NADP+還原生成NADPH,在340 nm 下測定NADPH 增加速率。
 

需自備的儀(yi) 器和用品:
紫外分光光度計、水浴鍋、台式離心機、可調式移液器、1 mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸
餾水。
 

試劑的組成和配製:
提取液:60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體(ti) 47.5 mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 支,-20℃保存;
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存;

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測定步驟:
1、 分光光度計預熱30min 以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。
2、 將試劑二和試劑三轉移至試劑一中充分溶解;在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)
水浴10min 以上;用不完的試劑分裝後-20℃保存,禁止反複凍融。
3、 在1mL 石英比色皿中加入50μL 樣本和950μL 試劑一,混勻後立即記錄340nm 處1min
後吸光值A1 和 6min 後的吸光值A2,計算ΔA=A2-A1。
 

注意:若ΔA 大於(yu) 0.5,需將酶液用提取液稀釋,計算公式中乘以相應稀釋倍數。或將反應
時間縮短至2min,使A2-A1 小於(yu) 0.5,可提高檢測靈敏度。

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