細胞色素C（Cyt-c）elisa試劑盒太了

細胞色素C(Cyt-c)elisa試劑盒基本信息簡介

細胞色素一類以鐵卟啉（或血紅素）作為(wei) 輔基的電子傳(chuan) 遞蛋白，廣泛參與(yu) 動、植物，酵母以及好氧菌、厭氧光合菌等的氧化還原反應。細胞色素作為(wei) 電子載體(ti) 傳(chuan) 遞電子的方式是通過其血紅素輔基中鐵原子的還原態(Fe2+)和氧化態（弤）之間的可逆變化。任何一類細胞蛋白（血紅素蛋白），在細胞能量轉移中起著極為(wei) 重要的作用。細胞色素可按其吸收的光的波長分為(wei) 3類，已鑒定出至少30種不同的細胞色素。

細胞色素C(Cyt-c)elisa試劑盒操作方法簡介

實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測範圍。

1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，餘(yu) 孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鍾。

為(wei) 保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體(ti) ，甩幹，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體(ti) 工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體(ti) 加99μl生物素標記抗體(ti) 稀釋液的比例配製，輕輕混勻，在使用前一小時內(nei) 配製），37℃,60分鍾。

3. 溫育60分鍾後，棄去孔內(nei) 液體(ti) ，甩幹，洗板3次，每次浸泡1-2分鍾，350μl/每孔，甩幹。

4.每孔加辣根過氧化物酶標記親(qin) 和素工作液（同生物素標記抗體(ti) 工作液） 100μl，37℃，60分鍾。

5. 溫育60分鍾後，棄去孔內(nei) 液體(ti) ，甩幹，洗板5次，每次浸泡1-2分鍾，350μl/每孔，甩幹。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鍾內(nei) ，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，後3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與(yu) 底物液的加入順序相同。為(wei) 了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到後應盡快加入終止液。

8. 用酶聯儀(yi) 在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液後15分鍾以內(nei) 進行檢測。

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